二苯并噻吩脫硫菌的篩選及其代謝途徑研究.pdf

1、二苯并噻吩（DBT）是石油中主要的雜環(huán)類有機(jī)硫化物，且很難被傳統(tǒng)的脫硫法去除。因此，在生物脫硫的研究中常以DBT作為模型化合物。本文采用DBT作為唯一硫源，從被石油污染的廢水中分離出一株高活性的能專一降解DBT的脫硫菌6-1。16S rDNA基因序列分析結(jié)果顯示，菌株6-1的16S rDNA基因序列長度有1469 bp，該基因序列與Cronobacter turicensis的的16S rDNA基因的序列一致性為99％。因此，初步鑒定該

2、菌株為Cronobacter turicensis。
　　 通過測(cè)定該菌株的生長曲線發(fā)現(xiàn)，菌株6-1生長大約12h后進(jìn)入對(duì)數(shù)期，對(duì)數(shù)期持續(xù)約50h。此后其生長進(jìn)入穩(wěn)定期，穩(wěn)定期持續(xù)約40h，期間菌株細(xì)胞濃度基本不變。通過測(cè)定該菌株的脫硫曲線發(fā)現(xiàn)，從36h到48h，DBT的濃度從初始的0.2 mmol/L降解到0.0275mmol/L，對(duì)DBT的降解率達(dá)86.75％。
　　 通過五組單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，對(duì)脫硫菌6-1的培

3、養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，得到了菌株6-1的最優(yōu)培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基初始pH為7.0，發(fā)酵溫度為30℃；最佳碳源為2g/L的甘油；最優(yōu)氮源為2g/L的氯化銨；最佳初始DBT濃度為0.2mmol/L。
　　 采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)DBT降解菌代謝途徑進(jìn)行研究。將發(fā)酵物經(jīng)過酸化后萃取，分別在保留時(shí)間為8.809min和9.204min檢測(cè)到中間代謝產(chǎn)物正十二烷和4,5-二甲基辛烷。最終代謝產(chǎn)物為CO2，H2O，有機(jī)硫被氧化成硫酸根離子釋放到水