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1、從內(nèi)蒙古地區(qū)傳統(tǒng)谷物發(fā)酵食品—酸粥中分離并鑒定的13株乳桿菌中篩選具有抑菌活性的菌株,并對其抑菌能力及抑菌物質(zhì)的特性進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下:
?。?)13株自酸粥中分離的乳桿菌對傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,13株乳桿菌對傷寒沙門氏菌的抑菌效果最明顯,對金黃色葡萄球菌的抑制效果稍差。其中乳桿菌株 SZL-1和SZL-7對傷寒沙門氏菌的抑菌作用最強(qiáng);SZL-2和SZL
2、-5對大腸桿菌抑菌作用的最強(qiáng);SZL-8和SZL-11對枯草芽孢桿菌的抑菌作用較強(qiáng);SZL-3和SZL-8對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強(qiáng)。
?。?)對13株乳桿菌的發(fā)酵液及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),結(jié)果顯示,13株菌株發(fā)酵液及其代謝產(chǎn)物對致病菌均有較強(qiáng)的抑菌活性,且抑菌活性基本相同;抑菌活性受pH值的影響較大,隨著pH值的升高逐漸降低,除SZL-1和SZL-12菌株在pH6.0具有抑菌作用,其余菌株在弱酸、中性和堿性條件下基本
3、沒有抑菌活性;代謝產(chǎn)物經(jīng)過氧化氫酶處理后,SZL-1和SZL-12菌株的抑菌活性明顯降低,其余菌株的抑菌圈直徑基本不變;將SZL-1和SZL-12代謝產(chǎn)物經(jīng)蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、溶菌酶處理,結(jié)果抑菌能力均有不同程度的降低,說明抑菌物質(zhì)對蛋白酶敏感,故判定抑菌物質(zhì)中有蛋白類細(xì)菌素。代謝產(chǎn)物熱穩(wěn)定性較好,在100℃下處理30min抑菌活性基本未變;13株乳桿菌的代謝產(chǎn)物中主要起抑制作用的是各種酸性物質(zhì)(主要是乳酸)和細(xì)菌
4、素類物質(zhì)。
(3)采用單因素分析法與正交試驗(yàn)相結(jié)合的方法,確定乳桿菌SZL-1和SZL-12產(chǎn)細(xì)菌素的最適發(fā)酵條件。SZL-1菌株的最佳發(fā)酵條件為:接種量7%,發(fā)酵時間24h,培養(yǎng)溫度37℃,起始pH6.0;SZL-12菌株的最佳發(fā)酵條件為:接種量5%,發(fā)酵時間36h,培養(yǎng)溫度37℃,起始pH6.0。
?。?)通過研究細(xì)菌素對熱的穩(wěn)定性、pH的耐受性、金屬離子的敏感度及抑菌譜,了解細(xì)菌素粗提液的生物學(xué)特性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明
5、,SZL-1所產(chǎn)細(xì)菌素對熱有良好的耐熱性,抑菌活性的pH范圍在2.0~8.0,Na+、K+、Fe2+對其抑菌活性有增強(qiáng)作用,Ca2+和Zn2+對其抑菌活性有抑制作用;SZL-12菌株產(chǎn)生的細(xì)菌素對熱有較好的穩(wěn)定性,抑菌活性的pH范圍在2.0~7.0,加入K+、Ca2+后,其抑菌活性略有下降,加入Zn2+、Na+和Fe2+后促進(jìn)抑菌物質(zhì)的合成,其中Na+和Fe2+促進(jìn)效果顯著。SZL-1和SZL-12產(chǎn)生的細(xì)菌素對革蘭氏陰性和革蘭氏陽性菌
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