凝結(jié)芽孢桿菌抑菌物質(zhì)分離鑒定及其對(duì)大黃魚(yú)保鮮效果的研究.pdf

1、養(yǎng)殖大黃魚(yú)魚(yú)肉營(yíng)養(yǎng)豐富，成為大眾膳食結(jié)構(gòu)中重要的一環(huán)。也正因?yàn)樗牡鞍踪|(zhì)含量較高，故極易受到自身蛋白酶和腐敗菌的雙重作用，致使其在儲(chǔ)藏過(guò)程中產(chǎn)生降解與變性，最后導(dǎo)致魚(yú)肉營(yíng)養(yǎng)成分流失、感官特性變差及新鮮度降低，嚴(yán)重?fù)p壞了大黃魚(yú)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
　　本研究基于天然生物防腐保鮮劑的在實(shí)際應(yīng)用中的優(yōu)勢(shì)，針對(duì)我實(shí)驗(yàn)室自行分離得到的益生菌Bacillus coagulans LL1103，研究了其胞外抑菌物質(zhì)的理化特性并對(duì)抑菌物質(zhì)進(jìn)行了分離純

2、化和初步鑒定，最后將分離純化出來(lái)的細(xì)菌素Lactocin LL1103的粗提液應(yīng)用到了大黃魚(yú)保鮮當(dāng)中，相關(guān)結(jié)論如下:
　　1、以凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus coagulans LL1103為研究對(duì)象，研究了其生長(zhǎng)情況與pH值及抑菌能力的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)其最佳抑菌發(fā)酵時(shí)間為18h。制備了其抑菌產(chǎn)物粗品并測(cè)定其抑菌譜，結(jié)果表明，抑菌產(chǎn)物對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有明顯的抑菌效果，具有廣譜抗菌性。隨后對(duì)抑菌產(chǎn)物粗品的理化性質(zhì)進(jìn)行了研究，

3、發(fā)現(xiàn)它在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，最適溫度37℃，最適pH=6.0下具有最強(qiáng)的抑菌活性。
　　2、展開(kāi)了抑菌物質(zhì)的初步鑒定，在排除酸性末端產(chǎn)物和菌體的干擾后，用蛋白酶K等多種蛋白酶和過(guò)氧化氫酶去處理抑菌產(chǎn)物粗品，發(fā)現(xiàn)其對(duì)蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶較敏感，對(duì)氧化氫酶不敏感，初步推斷抑菌物質(zhì)的主要成分是對(duì)蛋白酶敏感的細(xì)菌素類(lèi)物質(zhì)。
　　3、對(duì)凝結(jié)芽孢桿菌抑菌物質(zhì)粗品采用硫酸銨分級(jí)沉淀法進(jìn)行細(xì)菌素Lactocin LL1103的粗提

4、，細(xì)菌素粗品經(jīng)Tricine-SDS-PAGE蛋白電泳和活性測(cè)定后確定其分子量在2.4kDa上下;后對(duì)其進(jìn)行凝膠過(guò)濾和色譜精制，最后得到了Lactocin LL1103純品，并進(jìn)行N-端氨基酸測(cè)序，獲得序列為:GEPGPAGAVGPAGKQGPPGPQGPTGPP。
　　4、采用了不同濃度的Lactocin LL1103粗提物進(jìn)行大黃魚(yú)冷藏保鮮試驗(yàn)，測(cè)定了TVB-N、TBA、K值、感官指標(biāo)、pH值、微生物指標(biāo)這幾個(gè)保鮮指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)各