近紅外光譜法應(yīng)用于肝素鈉質(zhì)量控制的技術(shù)研究.pdf

1、肝素(Heparin)是一種糖胺聚糖類藥物，是重復(fù)二糖單位組成的多糖鏈的混合物，具備抗凝活性、抗血栓生成活性、抑制平滑肌細(xì)胞增殖、抗炎癥、抗腫瘤及抗病毒等生物學(xué)功能，是需要迅速達(dá)到抗凝作用的首選藥物，在臨床上得到廣泛應(yīng)用。
　　 2008年2月底，在美國發(fā)生了肝素鈉事件---4人因使用百特公司所產(chǎn)的肝素鈉死亡，并有300多人產(chǎn)生嚴(yán)重副作用。肝素鈉事件在世界范圍內(nèi)引起了廣泛的探討與研究，有報告聲稱該事件疑似與存在的“類肝素樣物質(zhì)"

2、--多硫酸軟骨素(oversulfated chondroitin sulfate，OSCS)有關(guān)。FDA分析結(jié)果表明：“類肝素樣物質(zhì)"約占肝素鈉總量的5％～20％，個別樣品甚至高達(dá)30％。國內(nèi)外的研究表明，可以用于分析肝素鈉中的OSCS的方法有毛細(xì)管電泳分析技術(shù)（capillaryelectrophoresis，CE）、核磁共振技術(shù)(nuclear magnetic resonance，NMR)，醋酸纖維薄膜/平板（cellulose

3、 acetate membrane/plate，CAM/P）電泳技術(shù)，紅外檢測技術(shù)(infrared spectroscopy,IR)，高效液相色譜分析技術(shù)(high performance liquidchromatography,HPLC)等。
　　 美國FDA認(rèn)為，質(zhì)量不是檢測出來的，而是應(yīng)該包含在過程設(shè)計中，或者說是設(shè)計出來的。FDA于2004年提出過程分析技術(shù)(process analytical technology

4、,PAT)指南，其核心就是推動制藥企業(yè)將現(xiàn)代過程分析、監(jiān)控技術(shù)引入到生產(chǎn)過程的各個環(huán)節(jié)當(dāng)中，通過增加對生產(chǎn)過程的了解，有效控制工藝過程，實現(xiàn)風(fēng)險最小化，加強(qiáng)企業(yè)的競爭力，提高產(chǎn)品質(zhì)量。
　　 對肝素鈉的生產(chǎn)過程進(jìn)行控制是保障其質(zhì)量的重要手段。而常規(guī)方法均為抽樣有損檢測，消耗試劑，樣品預(yù)處理過程繁瑣，并可造成一定的污染，無法對肝素鈉生產(chǎn)過程進(jìn)行在線控制。目前近紅外光譜分析技術(shù)（near infrared spectroscopy,

5、NIRS）已經(jīng)發(fā)展成為最重要的PAT技術(shù)之一。NIRS是指利用近紅外譜區(qū)包含的物質(zhì)信息，依靠化學(xué)計量學(xué)算法和計算機(jī)軟硬件技術(shù)對有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的一種現(xiàn)代分析技術(shù)，具有穿透力強(qiáng)、無需制樣、不破壞樣品、分析速度快、可通過光纖進(jìn)行遠(yuǎn)距離在線檢測等特點(diǎn)，在制藥領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
　　 效價和雜質(zhì)含量是表征肝素鈉質(zhì)量的重要參數(shù)，所以我們從這兩方面入手，運(yùn)用NIRS結(jié)合化學(xué)計量學(xué)算法建立了肝素鈉粗品、精品效價的分析模型，考察了不同

6、光譜預(yù)處理方法、建模光譜區(qū)域?qū)δＰ偷挠绊?，并模擬配制了含有OSCS的肝素鈉樣品。主成分?jǐn)?shù)(PLS Components，PCs)、校正集相關(guān)系數(shù)(correlationcoefficient of calibration set,Rc)、交叉驗證均方根誤差(the root mean square ofcross-validation,RMSECV)、驗證集相關(guān)系數(shù)(correlation coefficient of predicti

7、onset,Rp)、預(yù)測均方根誤差(the root mean square of prediction，RMSEP)被選作驗證模型能力的重要參數(shù)。結(jié)果表明運(yùn)用NIRS不僅能夠鑒別肝素鈉樣品中是否含有OSCS，而且能夠預(yù)測肝素鈉中OSCS的含量，因此該方法可作為肝素鈉生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量控制(quality control，Qc)部門的源頭判斷實驗技術(shù)和終點(diǎn)放行實驗技術(shù)，從而建立了肝素鈉質(zhì)量控制的新方法。
　　 由于時間問題，我們僅對N