黑果小檗質(zhì)量控制及近紅外光譜技術(shù)在質(zhì)量控制中的應(yīng)用.pdf

1、目的：建立新疆特色藥材黑果小檗質(zhì)量控制的方法，探討應(yīng)用近紅外光譜技術(shù)結(jié)合光譜處理軟件及化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對該藥材進(jìn)行定量分析及鑒別。
　　方法：1.建立薄層色譜法對黑果小檗藥材進(jìn)行鑒別，以鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿為對照品，并考察不同展開系統(tǒng)、不同點(diǎn)樣量、不同薄層板、不同檢視方式、不同溫度、不同濕度對黑果小檗藥材薄層色譜的影響；2.建立HPLC雙波長法同時測定黑果小檗中鹽酸藥根堿、鹽酸小檗胺、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿含量的方法，

2、測定不同產(chǎn)地不同藥用部位4種生物堿的含量并進(jìn)行比較；3.測定了10批黑果小檗藥材樣品的水分和總灰分；4.采用紫外分光光度法測定黑果小檗中總黃酮的含量，并通過DPPH、羥自由基和超氧自由基清除法評價黑果小檗提取物的抗氧化活性；5.以聚酰胺薄膜為固定相，微乳液作為展開劑，同時鑒別黑果小檗藥材中的多種主要成分，考察微乳類型、十二烷基硫酸鈉、正丁醇、甲酸等因素對分離效果的影響；6.近紅外漫反射光纖光譜結(jié)合偏最小二乘法、主成分回歸法建立數(shù)學(xué)模型對

3、黑果小檗皮中鹽酸小檗堿進(jìn)行快速定量分析；7.近紅外漫反射光纖光譜結(jié)合主成分分析和聚類分析對黑果小檗皮產(chǎn)地及真?zhèn)蔚蔫b別。
　　結(jié)果：1.以鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿為對照品，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-氨水(6:3:2:1.5:0.5)為展開系統(tǒng)，黑果小檗藥材薄層鑒別特征明顯；2.建立了利用HPLC測定黑果小檗中生物堿含量的方法，在該色譜條件下，鹽酸藥根堿、鹽酸小檗胺、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿分別在1.95~62.4μg·

4、mL-1、9.80~313.60μg·mL-1、1~32μg·mL-1、4.93～157.6μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，r=0.9998、0.9997、0.9999、0.9999(n=6)，平均加樣回收率分別為99.27％、98.46%、99.26%、98.46%，RSD分別為2.17%、2.35%、2.94%、1.63%(n=9)；3.根據(jù)樣品水分及總灰分測定結(jié)果，建議黑果小檗皮藥材水分含量控制在8.05%以下，將黑果小檗果藥

5、材水分含量控制在15.48%以下；黑果小檗皮總灰分含量控制在7.82%以下，黑果小檗果總灰分控制在4.15%以下；4.利用紫外分光光度法測得黑果小檗果實(shí)中總黃酮含量較高，其次為莖皮及根皮；黑果小檗各藥用部位提取液對DPPH清除活性的變化規(guī)律為：果>莖皮>根皮；對·OH清除活性的變化規(guī)律為：根皮>莖皮；對 O2·-清除活性的變化規(guī)律為：果>莖皮>根皮；5.以微乳液(SDS-正丁醇-正庚烷-水=2.7∶6.3∶1.0∶30.0，g/g)為展

6、開劑，同時檢出黑果小檗皮中鹽酸小檗堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀，操作簡單，分離效果理想；6.黑果小檗皮近紅外光譜結(jié)合偏最小二乘回歸和主成分回歸法建立其定量分析模型，結(jié)果表明，黑果小檗皮中鹽酸小檗堿的內(nèi)部交叉驗(yàn)證均方差分別為0.8102、1.0169，內(nèi)部交叉驗(yàn)證決定系數(shù)分別為0.9871、0.9795，預(yù)測平均回收率分別為101.40%、108.51%，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)表明NIR預(yù)測值與標(biāo)準(zhǔn)方法測定值之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明利用近紅外光譜法

7、對黑果小檗進(jìn)行定量分析可行；7.主成分分析及聚類分析可將收集到的39份黑果小檗皮樣本分為3大產(chǎn)區(qū)，所建立的定性鑒別模型對其余14份預(yù)測集樣本進(jìn)行鑒別，分析結(jié)果與實(shí)際所屬基本一致。表明利用近紅外光譜法對黑果小檗皮進(jìn)行產(chǎn)地及真?zhèn)舞b別可行。
　　結(jié)論：本研究建立了新疆特色藥材黑果小檗的TLC定性鑒別方法及HPLC測定生物堿含量的方法，所制定的方法可用于評價和控制黑果小檗藥材的質(zhì)量；黑果小檗提取物具有一定的抗氧化能力，本研究可為天然抗氧化

8、劑的開發(fā)提供依據(jù)；研究建立的微乳薄層色譜鑒別法作為一種新型的色譜技術(shù)，可以簡便、準(zhǔn)確、高效地鑒別黑果小檗中生物堿，且點(diǎn)樣量為普通色譜條件用量的一半，檢出靈敏度顯著提高，并且不使用刺激性強(qiáng)且有毒的有機(jī)溶媒如濃氨水、甲苯等，減少了環(huán)境污染并降低了實(shí)驗(yàn)成本；近紅外漫反射光譜技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法具有分析速度快、效率高、成本低、測量重現(xiàn)性好、樣品測量一般無需預(yù)處理且分析過程不破壞樣品等特點(diǎn)，本課題利用其獨(dú)特的優(yōu)勢應(yīng)用于黑果小檗皮的定性及定量分析