蝦青素高產(chǎn)菌株的推理篩選與發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、天然蝦青素具有極強(qiáng)的抗氧化、抑制腫瘤、增強(qiáng)免疫力、著色以及清除體內(nèi)自由基等許多作用，近年來(lái)在食品、醫(yī)藥、飼料、水產(chǎn)、化妝品等行業(yè)得到了廣泛的應(yīng)用。紅法夫酵母（Phaffia rhodozyma）是天然蝦青素最具有工業(yè)化生產(chǎn)前景的微生物資源。提高紅法夫酵母合成蝦青素的水平是實(shí)現(xiàn)發(fā)酵法生產(chǎn)蝦青素的關(guān)鍵。新技術(shù)措施及新理論的應(yīng)用是提高紅法夫酵母合成蝦青素水平的基礎(chǔ)。本研究圍繞提高紅法夫酵母合成蝦青素水平這一核心內(nèi)容，利用現(xiàn)代統(tǒng)計(jì)分析技術(shù)、現(xiàn)代

2、生物技術(shù)、現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)，系統(tǒng)進(jìn)行了紅法夫酵母中蝦青素的破壁提取方法、高產(chǎn)菌株的推理選育、搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件優(yōu)化的研究。主要獲得以下研究結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)采用多次紫外線誘變、微波誘變推理選育，得到具有硫酸銅、β-紫羅酮和二苯胺抗性的高產(chǎn)菌株。最終篩選獲得一株遺傳穩(wěn)定性良好、蝦青素產(chǎn)量高的突變菌株TY-I-8，蝦青素含量較出發(fā)菌株提高了4.9倍。
　　 2.實(shí)驗(yàn)選取了玉米漿作為初始發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行了搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基和

3、發(fā)酵條件優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)表明：濃度為1％的玉米漿為最優(yōu)的氮源濃度，葡萄糖：蔗糖（1:3）為最優(yōu)的碳源。在此培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，通過(guò)響應(yīng)面規(guī)范性分析及驗(yàn)證試驗(yàn)獲得回歸方程：Y=13.96027+0.022438×X2-0.023625×X3-0.047887×X5-0.064171×X2×X2+0.00925×X2×X3-0.001125×X2×X5-0.081946×X3×X3+0.0277×X3×X5-0.071221×X5

4、×X5。通過(guò)模型預(yù)測(cè)和驗(yàn)證試驗(yàn)得到最優(yōu)的發(fā)酵條件：初始pH6.0、裝液量28.3mL/250mL、接種量5.8％、溫度20℃、轉(zhuǎn)速200r/min，蝦青素產(chǎn)量較優(yōu)化前提高了8.61％。
　　 3.利用響應(yīng)面法對(duì)微波輔助二甲基亞砜破壁提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，得到回歸模型：Y=1508.139+11.6675×X2-12.285×X3-24.9015×X5-17.76883×X2×X2+4.81×X2×X3-0.585×X2×X5-27.