氨基葡萄糖酸高產(chǎn)菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、D-氨基葡萄糖酸(2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖酸)，是根瘤菌脂多糖的一種成分，是合成多種手性稱氨基酸的原料。D-氨基葡萄糖酸(D-GlcNA)作為一種陽離子配位劑被廣泛研究，其與鉑的絡(luò)合物能用于治療癌癥。D-氨基葡萄糖酸與三價(jià)鉻形成的鉻配位化合物作為人體生物活性元素鉻的補(bǔ)充，可以改善糖尿病癥狀，特別在快速降低血糖方面有顯著效果。D-氨基葡萄酸自身特有的生物活性，還使得該藥物兼有降脂、減肥等功效。該化合物在帶電生物分子色譜中也有潛在應(yīng)用

2、。
　　 微生物法發(fā)酵氧化D-氨基葡萄糖制備D-氨基葡萄糖酸能夠克服化學(xué)法不易定位、氧化程度不易控制等弱點(diǎn)。本研究以高濃度D-氨基葡萄糖鹽酸鹽(D-glucosaminate.hydrochloric)為碳源篩選到一株能氧化D-氨基葡萄糖生成D-氨基葡萄糖酸(D-glucosaminic acid)的高產(chǎn)菌株M123，即使在氧化發(fā)酵的后期菌株對產(chǎn)物的利用也極其微弱，具備了生物轉(zhuǎn)化高產(chǎn)菌的優(yōu)良特征。經(jīng)Biolog鑒定系統(tǒng)與16S

3、rDNA測序分析鑒定為Pseudomonas putida。經(jīng)單因子和正交試驗(yàn)對培養(yǎng)基優(yōu)化后，得出較佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：D-氨基葡萄糖鹽酸鹽3％，葡萄糖0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，七水合硫酸鎂0.05％，碳酸鈣1％，尿素0.3％，酵母粉0.2％；較佳的培養(yǎng)條件為30℃、培養(yǎng)基初始pH6.0、180r m-1進(jìn)行發(fā)酵。從30g/L氨基葡萄糖鹽酸鹽出發(fā)，發(fā)酵48h可制備得27 g/L D-GlcNA，D-氨基葡萄糖鹽酸鹽摩爾轉(zhuǎn)化率近100