黃色短桿菌催化糊精合成海藻糖的研究.pdf

1、海藻糖(Trehalose)是由兩個(gè)葡萄糖分子以α-(1-1)糖苷鍵連接的非還原性雙糖。在自然界中廣泛存在于植物、昆蟲、大型真菌、乳酸菌、酵母等生物體中。海藻糖獨(dú)特的生物學(xué)特性及優(yōu)越的理化性質(zhì)使其在食品、化妝品、農(nóng)業(yè)及醫(yī)學(xué)等很多領(lǐng)域都具有廣泛的用途。黃色短桿菌(Brevibacterium helvolum)是已報(bào)道的體內(nèi)含有海藻糖轉(zhuǎn)化酶系的菌種之一,其胞內(nèi)的低聚麥芽糖苷基海藻糖合成酶(maltooligosyl trehalose s

2、ynthase,MTSase)和低聚麥芽糖苷基海藻糖水解酶(maltooligosyl trehalose trehalohydrolase,MTHase)能夠作用于聚合度三及以上的麥芽糊精,生成海藻糖。本文研究了利用黃色短桿菌轉(zhuǎn)化液化淀粉(麥芽糊精)生成海藻糖的方法。通過對(duì)薄層色譜和高效液相色譜條件的研究,建立了對(duì)海藻糖及其反應(yīng)體系進(jìn)行定性及定量分析的方法;從實(shí)驗(yàn)室保藏的菌株中,篩選得到了一株高產(chǎn)海藻糖的黃色短桿菌;對(duì)淀粉液化生產(chǎn)糊精

3、的工藝進(jìn)行了優(yōu)化,建立了適合于黃色短桿菌生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)海藻糖的原料糊精的工藝路線;對(duì)黃色短桿菌培養(yǎng)工藝進(jìn)行了考察和優(yōu)化,提出了優(yōu)化的培養(yǎng)基組成及培養(yǎng)工藝;通過對(duì)黃色短桿菌細(xì)胞預(yù)處理、轉(zhuǎn)化工藝條件的研究,初步建立了利用黃色短桿菌轉(zhuǎn)化糊精獲得海藻糖的工藝。通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),利用糊精做碳源,在搖瓶裝液量為80mL/500mL,27℃,初始pH6.5的條件下培養(yǎng)3天,菌體密度達(dá)到最大值。利用此時(shí)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化濃度為5％,DE值為15左右的液化淀粉,在