豆粕生產(chǎn)大豆肽的工藝研究.pdf

1、酶解或微生物發(fā)酵大豆、豆粕或大豆蛋白可以得到大豆肽。大豆肽通常由2~9個(gè)氨基酸組成，其中必需氨基酸平衡良好、含量豐富。大豆肽獨(dú)特的理化特性和生理功能使大豆肽可被廣泛應(yīng)用于食品、日用品、醫(yī)藥保健品等相關(guān)行業(yè)中。我國(guó)于20世紀(jì)80年代開(kāi)始大豆肽的研究，并在基礎(chǔ)理論研究方面取得許多成果，但是生產(chǎn)成本高、水解度不高是制約大豆肽產(chǎn)業(yè)化的主要因素。
　　本文以脫脂豆粕為原料，以水解度和可溶性氮指數(shù)為指標(biāo)，選用堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶為水解酶，以

2、酶解pH值、酶解溫度、堿性蛋白酶（風(fēng)味蛋白酶）酶與底物濃度比以及底物濃度設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)，分別研究各因素對(duì)兩種酶水解豆粕的影響，得出堿性蛋白酶水解豆粕的最佳條件為：pH為8.5，溫度為55℃，酶與底物濃度比2％，底物濃度為8%；風(fēng)味蛋白酶水解豆粕的最佳條件為：pH為7.0，溫度為50℃，酶與底物濃度比為3%，底物濃度為8%。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)4因素3水平的響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)來(lái)優(yōu)化堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶雙酶酶解豆粕的條件。通過(guò)Design-

3、Expert軟件分析得出最佳條件：pH8.0，溫度56.03℃，堿性蛋白酶與底物比3%，風(fēng)味蛋白酶與底物比3.56%，底物濃度8%，此時(shí)水解度為44.17%，可溶性氮指數(shù)為85.89%。在最佳酶解條件的前提下，以水解過(guò)程中水解度進(jìn)程為依據(jù)確定最佳水解時(shí)間為6h。
　　選用DA201-CⅡ型大孔樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，條件為：填料的徑高比為1:35，水解液和樹(shù)脂體積比為1:1，大豆肽溶液的pH值為2.0，上樣流速1ml/min、上樣量40ml

4、、洗脫流速2.0ml/min,最佳洗脫液為75%的乙醇。經(jīng)75%乙醇洗脫后，脫鹽率為82.69%，脫色率為62.34%，肽損失率為8.34%。取經(jīng)大孔樹(shù)脂脫色脫鹽的濃縮肽粉溶解于少量的超純水，適量加到Sephadex G-15柱上（1.6cm×50cm），在室溫下用超純水進(jìn)行洗脫，洗脫流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm，共得到4個(gè)組分a、b、c、d，其中a峰為柱前峰，通過(guò)分子量標(biāo)準(zhǔn)物洗脫體積與分子量對(duì)數(shù)做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到其