聚甲基丙烯酸甘油酯胺基衍生物、硫脲衍生物的合成及其作為基因載體的性能研究.pdf

1、研究發(fā)現(xiàn)硫脲基團(tuán)可以與pDNA上的磷酸基團(tuán)產(chǎn)生較強(qiáng)的作用。在本研究中，第一步，通過原子轉(zhuǎn)移自由基聚合(ATRP)合成分子量分布較窄的線型和五臂的聚甲基丙烯酸甘油酯（L-PGMA/S5-PGMA）;第二步，利用不同的二胺三胺，如丁二胺(B)，乙二胺(E)和二乙烯三胺(D)，對PGMA進(jìn)行聚合后修飾，得到不同胺基修飾不同胺基取代率的胺基聚甲基丙烯酸甘油酯（胺基PGOHMAs），包括L-B，S5-B，L-E，S5-E和L-D;第三步，繼續(xù)用異

2、硫氰酸甲酯(M)，異硫氰酸丙酯(P)對胺基PGOHMAs進(jìn)行聚合后修飾，得到不同異硫氰酸酯修飾不同硫脲轉(zhuǎn)化率的聚甲基丙烯酸甘油酯硫脲衍生物(TPGOHMAs)，包括L-BM，L-BP，S5-BM，L-EM，S5-EM和L-DM（其中M代表異硫氰酸甲酯，P代表異硫氰酸丙酯）。對所合成的胺基PGOHMAs和TPGOHMAs高分子進(jìn)行核磁共振光譜(1HNMR)，傅里葉紅外光譜(FT-IR)，凝膠滲透色譜(GPC)，pH滴定及元素分析等表征，得

3、到了修飾成功的高分子。
　　 根據(jù)高分子中N元素含量與pDNA中磷酸基團(tuán)的P元素含量，將所得到的高分子與pDNA構(gòu)造為不同N/P摩爾比例的復(fù)合體，對其作為基因載體的的性質(zhì)進(jìn)行研究。通過凝膠電泳實(shí)驗得到TPGOHMAs比胺基PGOHMAs有更強(qiáng)的負(fù)載pDNA的能力。通過透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn):TPGOHMAs/pDNA復(fù)合體和胺基PGOHMAs/pDNA復(fù)合體都是規(guī)則球形粒子，并且粒徑范圍在60士33nm，比動態(tài)光散射實(shí)驗(DLS)所測

4、定的粒子水合粒徑要小。zeta電勢測定結(jié)果顯示:TPGOHMAs/pDNA復(fù)合體比胺基PGOHMAs/pDNA復(fù)合體擁有更低的粒子電勢。有趣的是，凝膠電泳和溴化乙錠(EB)置換實(shí)驗都說明:與胺基PGOHMAs相比，TPGOHMAs能在較低的N/P比下與pDNA復(fù)合。MTT細(xì)胞毒性實(shí)驗結(jié)果表明:TPGOHMAs高分子顯示出比胺基PGOHMAs更低的細(xì)胞毒性。在Huh-7細(xì)胞體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗中，除L-DM/pDNA復(fù)合體外，其余TPGOHMAs