高效纖維素分解菌的篩選、鑒定及其生長條件和產(chǎn)酶活性的研究.pdf

1、產(chǎn)纖維素酶微生物在轉(zhuǎn)化可再生纖維素資源、提高畜禽飼料利用率和清除環(huán)境污染方面具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。而產(chǎn)酶菌株的篩選和酶活研究是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的基礎(chǔ)。 本研究利用選擇培養(yǎng)基CMC培養(yǎng)基，從土壤中分離到12株降解纖維素的細(xì)菌，其中有3株具有較強(qiáng)的纖維素降解能力，編號(hào)為8、E、F，微生物學(xué)研究表明它們均為革蘭氏陽性細(xì)菌。對(duì)菌株進(jìn)行初步發(fā)酵培養(yǎng)并用DNS法進(jìn)行產(chǎn)酶活性分析，發(fā)現(xiàn)三株菌的產(chǎn)酶活力分別為5.73U/ml、13.07 U/ml、1

2、5.60U/ml。對(duì)其中產(chǎn)酶能力最強(qiáng)的F菌株進(jìn)行了生理生化和16S rRNA基因的鑒定，發(fā)現(xiàn)該菌是一株枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，命名為Bs.Zibof。 對(duì)Bs.Zibof進(jìn)行了產(chǎn)酶條件的優(yōu)化。結(jié)果表明，在25℃、30℃、37℃、42℃下Bs.Zibof都能產(chǎn)生纖維素酶，以30℃條件最佳；在pH5.0、pH6.0、pH7.0、pH8.0不同PH條件下，以pH7.0為Bs.Zibof的最佳產(chǎn)酶pH值。將Bs

3、.Zibof接種于CMC發(fā)酵培養(yǎng)液中，分別在各種不同的Ca2+濃度、Mg2+濃度、Mn2+濃度下培養(yǎng)，比較發(fā)現(xiàn)，Bs.Zibof的最適Ca2+濃度在0.007mmol/L左右，最適Mn2+濃度在0.013mmol/L左右，而Mg2+濃度在0～6.275mmol/L范圍內(nèi)濃度越高越有利于該菌株產(chǎn)酶。 本研究篩選到一株高效產(chǎn)纖維素酶活的細(xì)菌株并進(jìn)行了理化和16SrRNA基因的鑒定，對(duì)其產(chǎn)酶能力和最適產(chǎn)酶條件作了進(jìn)一步研究，這對(duì)將來開