NPCs凋亡吞噬對新生神經(jīng)元的可塑性影響及機理研究.pdf

1、神經(jīng)發(fā)生在哺乳動物的大腦中終生存在,新生神經(jīng)元主要在兩個區(qū)域產(chǎn)生:側腦室的室管膜下區(qū)(the subventricularzone, SVZ)和海馬齒狀回顆粒下層(the subgranularzone, SGZ)。這些新生細胞可能參與到大腦嗅球和海馬的一些功能活動中,對嗅覺、學習和記憶發(fā)揮重要的作用。DCX+標記的神經(jīng)前體細胞(Neural Precursor Cells, NPCs)是一個重要的吞噬細胞群,它們的吞噬活性能夠顯著的影

2、響神經(jīng)發(fā)生。吞噬細胞對凋亡細胞的攝取能夠提高胞內(nèi)AMP的水平,激活AMPK的活性,使AMPK的α催化亞基上的S172位點被磷酸化。γ-氨基丁酸(gamma aminobutyric acid, GABA)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的主要抑制性遞質(zhì),在新生神經(jīng)元中可由胞內(nèi)氯離子濃度的增高而具有興奮性。GABAB受體是一種二聚體G蛋白偶聯(lián)受體,由R1和R2兩個亞基組成,通過激活內(nèi)向鉀離子整流通道和抑制鈣離子通道介導慢性的突觸抑制作用。GABAB受體也

3、可在突觸成熟過程中發(fā)揮一定的作用, GABAB受體與AMPK有很強的親和性,AMPK被磷酸化以后可以和GABAB受體的R1亞基所結合,進而催化R2亞基的S783位點,從而影響GABAB受體在膜表面的重排與分布。GABAB受體的磷酸化能夠促進BDNF的分泌,從而促進GABA能突觸的成熟,影響神經(jīng)元的存活和分化。我們的實驗旨在于探究神經(jīng)前體細胞的凋亡吞噬影響神經(jīng)發(fā)生的機理,檢測AMPK激活和GABAB受體表達情況并觀察它們的這種變化在新生神

4、經(jīng)元的微管發(fā)育和膜受體亞基代謝方面的作用。利用C57BL/6J的成年小鼠尾靜脈注射Annexin V阻斷吞噬作用,結果表明海馬區(qū)域內(nèi)新生神經(jīng)元的數(shù)目和樹突長度均有顯著減少。進一步使用羧化物標記的熒光微珠檢測NPCs的吞噬能力,結果發(fā)現(xiàn)NPCs吞噬熒光微珠的數(shù)目隨著分化時間的延長而減少。通過紫外輻射處理的NPCs模擬凋亡細胞,與體外培養(yǎng)的神經(jīng)前體細胞共培養(yǎng)4小時后,通過免疫熒光檢測NPCs吞噬凋亡細胞后AMPK的磷酸化程度。結果表明吞噬凋