
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文檔簡介
1、目的: 研究皮質(zhì)發(fā)育畸形(MCD)仔鼠與正常仔鼠的生長發(fā)育差異,動態(tài)監(jiān)測層特異性標志物Map1b和AIS的標記物AnkG在MCD大鼠皮質(zhì)中的表達變化,揭示MCD大鼠皮質(zhì)AIS區(qū)的可塑性改變,為深入探討AIS對MCD大鼠模型癲癇易感的意義提供實驗室依據(jù)。
方法: 在SD大鼠胚胎17天時,向孕鼠腹腔注射卡莫司汀(BCMU),建立皮質(zhì)發(fā)育畸形仔鼠模型,對照組在相同時間注射10%葡萄糖溶液。選擇出生當天(P0),出生后7天(P7),1
2、4天(P14),28天(P28)和56天(P56)作為觀察時間點,分別在各時間點選取對照組和MCD組仔鼠進行體重,腦濕重,身長的測量。在各時間點每組隨機選取6只仔鼠用于制備石蠟切片和冰凍切片,采用HE染色方法觀察兩組仔鼠皮質(zhì)的形態(tài)改變,免疫組織化學染色方法觀察Map1b在兩組皮質(zhì)內(nèi)的表達差異,并驗證MCD模型是否成功,應用免疫熒光染色方法觀察AnkG在兩組皮質(zhì)內(nèi)的表達變化。
結果: 兩組仔鼠的體重在P0期無顯著差異(P>0.0
3、5),從P7后開始,之后的各時間點體重差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);兩組仔鼠的腦濕重在P0和P7無顯著差異(P>0.05),從P14開始,之后的各時間點差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);兩組仔鼠身長在各時間點均無顯著差異(P>0.05)。Map1b在對照組仔鼠顳葉皮質(zhì)中主要表達在Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ層,在各時間點的表達模式無明顯變化,Map1b在MCD組仔鼠顳葉皮質(zhì)中表達在Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ層。在MCD組仔鼠皮質(zhì)中,AnkG陽性細胞形態(tài)與對照組存在顯
4、著差異,AIS形態(tài)正?;瘯r間晚于對照組,AnkG陽性區(qū)域所代表的AIS長度在P0時與對照組無顯著差異(P>0.05),從P7開始,之后的各時間點的AIS長度均短于對照組(P<0.05)。
結論: Map1b在MCD組仔鼠皮質(zhì)中的表達位置由正常的ⅡⅢⅤ層轉移到ⅡⅢⅣ層對應的位置,提示在MCD大鼠皮質(zhì)中,Map1b所標記的陽性細胞發(fā)生遷移異常;MCD組仔鼠腦皮質(zhì)AIS的長度在出生一周后有所縮短,形態(tài)表現(xiàn)為螺旋狀或鋸齒狀彎曲,形態(tài)
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