PHA生產(chǎn)菌株的選育及其混合發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、聚羥基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)是由多種細(xì)菌合成的可完全生物降解的胞內(nèi)聚酯,其研究對(duì)于環(huán)境保護(hù)以及資源的可持續(xù)利用具有重要的意義。本論文從自然界篩選獲得2株具有PHA合成能力的菌株,利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化了混菌發(fā)酵工藝,并對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物的物化性能進(jìn)行了表征和分析,結(jié)果如下:
　　(1)從新疆12個(gè)采樣點(diǎn)中篩選獲得了2株P(guān)HA積累能力較高的菌株,通過(guò)形態(tài)、生理生化和16S rDNA等方法對(duì)其進(jìn)行鑒定,分

2、別命名為 Burkholderia cepacia WN-H41和Bacillus sp.1175,并且利用平板對(duì)峙法證實(shí)兩種細(xì)菌可共生。
　　(2)以2種目的菌株為研究對(duì)象,對(duì)PHA混合發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行了初步優(yōu)化。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)考察了種齡、接種比例、發(fā)酵周期、碳源、氮源等條件對(duì)PHA發(fā)酵的影響;Plackett-burman設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示蛋白胨、MgSO4·7H2O和可溶性淀粉的濃度對(duì)PHA產(chǎn)量貢獻(xiàn)較大。Box-Benhnken

3、Design實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在蛋白胨17 g/L,MgSO4·7H2O0.4 g/L,可溶性淀粉39 g/L的優(yōu)化條件下實(shí)際PHA產(chǎn)量為7.668 g/L,與理論值7.780 g/L相近,較最佳單因素條件產(chǎn)量提高了2.15倍。
　　(3)對(duì)單菌和混合發(fā)酵產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)、分子量、熱性能和拉伸性能進(jìn)行了分析比較,結(jié)果表明:3種發(fā)酵產(chǎn)物均為聚羥基丁酸(PHB),相比于單菌發(fā)酵,混合發(fā)酵合成PHB的平均分子量明顯增大(Mn=11.2×104),分