枯草芽孢桿菌CCAM080032的益生特性及高密度固態(tài)發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、因抗生素在飼料中的過(guò)度使用而導(dǎo)致的耐藥性、毒性殘留等一系列安全性問(wèn)題越來(lái)越引起人們的重視,尋找安全的抗生素替代品迫在眉睫。芽孢桿菌制劑不僅能夠抑制腸道病原菌的生長(zhǎng),提高動(dòng)物生產(chǎn)性能,而且會(huì)形成芽孢,對(duì)逆性環(huán)境具有很強(qiáng)的耐受力,因此在飼料業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 本課題是對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的一株枯草芽孢桿菌CCAM080032展開(kāi)研究,通過(guò)研究其在逆性環(huán)境的體外耐受能力以及產(chǎn)酶情況來(lái)評(píng)價(jià)其益生特性。然后,從培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件等方面對(duì)

2、該菌株的固態(tài)發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化,以期獲得較佳產(chǎn)孢條件,具體研究結(jié)果如下:
　　 1、耐受性試驗(yàn)表明,枯草芽孢桿菌CCAM080032能夠耐受14％NaCl的高滲壓,人工胃液、人工腸液以及膽鹽對(duì)芽孢的存活率幾乎沒(méi)有影響,并且具有較強(qiáng)的耐熱能力,當(dāng)處理溫度≤80℃時(shí),芽孢存活率仍可以維持在90％以上。
　　 2、枯草芽孢桿菌CCAM080032固態(tài)發(fā)酵的物料具有蛋白酶活性、木聚糖酶活性和纖維素酶活性,其中中性蛋白酶活力為107

3、.70 U/g,堿性蛋白酶活力為888.52U/g,木聚糖酶活力為20.28 U/g,纖維素酶活力為8.99 U/g。這三種酶的存在,有助于飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng),降低飼料成本,提高養(yǎng)殖效益。
　　 3、通過(guò)單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)方法,確定了枯草芽孢桿菌CCAM080032的最優(yōu)培養(yǎng)基與最佳培養(yǎng)條件為:稻草粉200 g,麩皮800 g,葡萄糖50 g,胰蛋白胨20 g,NH4NO315 g,KH2PO410 g,

4、H2O1500 g,按5％的比例接種菌齡為17 h的種子液,在37℃培養(yǎng)48 h后,芽孢產(chǎn)量可達(dá)到7.90×1010 CFU/g。
　　 4、將發(fā)酵過(guò)程起始溫度設(shè)為37℃,同時(shí)控制過(guò)程中最高溫度不超過(guò)45℃,最好保持37℃,并對(duì)物料進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆瓌?dòng),可以得到較高的芽孢產(chǎn)量。這一結(jié)論對(duì)于枯草芽孢桿菌的實(shí)際生產(chǎn)具有指導(dǎo)意義。
　　 5、應(yīng)用轉(zhuǎn)盤(pán)發(fā)酵得到的芽孢產(chǎn)量為1.06×1010 CFU/g,應(yīng)用通風(fēng)發(fā)酵罐得到的芽孢產(chǎn)量為1