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1、由于衣康酸(ItaconicAcid)具有特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu),決定了它具有十分活潑的化學(xué)性質(zhì),既可以自身聚合,也可以和其他分子發(fā)生加成、聚合等化學(xué)反應(yīng),是一種應(yīng)用前景十分廣闊的化學(xué)合成中間體,廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域,被譽(yù)為有機(jī)酸領(lǐng)域中皇冠上的寶石。本課題以土曲霉TN-474(AspergillusterreusTN-474)為衣康酸生產(chǎn)菌,以提高衣康酸的產(chǎn)量為目的,通過搖瓶實(shí)驗(yàn)對(duì)衣康酸發(fā)酵的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究,并在確立
2、較優(yōu)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上擴(kuò)大發(fā)酵規(guī)模,在50L發(fā)酵罐上進(jìn)行發(fā)酵條件的優(yōu)化。本文的研究結(jié)果如下: 通過研究不同因素對(duì)衣康酸發(fā)酵的影響,確定了土曲霉TN-474菌株深層發(fā)酵衣康酸的過程控制參數(shù)。在培養(yǎng)基成分方面,研究結(jié)果表明:作為衣康酸發(fā)酵的主氮源NH4NO3對(duì)衣康酸發(fā)酵的影響并不大,而作為輔助氮源的玉米漿干粉對(duì)衣康酸發(fā)酵的影響較顯著,磷元素有利于糖代謝的進(jìn)行和促進(jìn)菌體的生長,通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)KH2PO4對(duì)衣康酸發(fā)酵的影響也較大
3、,MgSO4·7H2O對(duì)菌種的產(chǎn)酸及菌體的生長有促進(jìn)作用,CuSO4·5H2O也能促進(jìn)菌株產(chǎn)酸。在培養(yǎng)條件方面,確定了搖瓶發(fā)酵過程中適宜的初始pH、溫度、接種量和裝液量,為50L罐發(fā)酵條件優(yōu)化奠定基礎(chǔ)。 確定搖瓶發(fā)酵較佳培養(yǎng)基組成為:葡萄糖140g/L,NH4NO33g/L,玉米漿干粉0.2g/L,KH2PO40.05g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CuSO4·5H2O0.065g/L。較佳的培養(yǎng)條件為:初始pH為2.
4、0,培養(yǎng)溫度37℃,搖瓶轉(zhuǎn)速220rpm接種量為10~12%,500mL三角瓶裝液量60~80mL。50L發(fā)酵罐適宜的攪拌轉(zhuǎn)速和通氣量分別為300rpm和0.25vvm。 在較佳培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,搖瓶發(fā)酵衣康酸的產(chǎn)量為71.83g/L,糖轉(zhuǎn)化率為56.69%,殘?zhí)菫?.46g/L,發(fā)酵時(shí)間為144h。在50L罐中發(fā)酵衣康酸的產(chǎn)量為77.15g/L,糖轉(zhuǎn)化率達(dá)到60.89%,殘?zhí)菫?.48g/L,衣康酸產(chǎn)量較搖瓶發(fā)酵提高了5.3
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