醋粉中降血脂成分篩選及其對脂質(zhì)代謝的調(diào)控.pdf

1、近年來，隨著生活習(xí)慣和飲食習(xí)慣的改變等多因素影響，高脂血癥發(fā)病率呈明顯增加趨勢。高脂血癥屬脂質(zhì)代謝紊亂所致，因血脂過高誘發(fā)的動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗死、腦中風(fēng)等心腦血管疾病已成為人類健康嚴重威脅。我國自古就用食醋作為民間藥物，關(guān)于食醋降脂、減肥之功效已有很多研究證實。醋粉作為食醋家族中新成員，既保留了食醋原有的營養(yǎng)功能特性又降低了食醋原有的刺激性，增加其攜帶運輸方便性，但是相關(guān)研究甚少。本文采用傳統(tǒng)食醋通過噴霧干燥制備醋粉，并通過動

2、物實驗對產(chǎn)品降血脂功能進行評價。建立降血脂功效成分的篩選方法，分離純化醋粉中降脂活性成分，確定醋粉中降脂特征性成分，并探討醋粉降血脂的物質(zhì)基礎(chǔ)。本研究主要內(nèi)容包括：
　　 ⑴研究確定了醋粉的最佳干燥工藝；確定了醋粉中降血脂特征性成分，為醋粉輔助降血脂產(chǎn)品開發(fā)和產(chǎn)品標準制定奠定了基礎(chǔ)。動物實驗結(jié)果表明，醋粉具有預(yù)防大鼠血清TG增高作用，降低最大幅度可達24.4％(p<0.01)，該醋粉具有顯著調(diào)節(jié)膽固醇代謝的作用；顯著降低受試大鼠

3、血清中 TC水平，最高達22.2％(p<0.01)；對升高大鼠血清HDL-C水平有明顯作用，最高達22.0％(p<0.05)；同時顯著提高HDL-C/TC比值，最高達48.3％(p<0.01)。因此，該醋粉可作為一種潛在的輔助調(diào)節(jié)血脂保健食品開發(fā)資源。
　　 ⑵建立了醋粉體外降血脂生物活性成分篩選平臺。體外模擬膽汁膠束法；基于微量比色法建立了高通量脂肪酶抑制劑篩選方法；建立了基于Hep-G2和RKO細胞的膽固醇流出篩選模型；建立

4、了肝臟X受體激活劑的細胞篩選模型，獲得LXR激活劑篩選的穩(wěn)定細胞株。以上四種篩選方法組成降脂活性成分篩選平臺，該平臺可以從不同途徑、多靶點對中草藥、天然產(chǎn)物、微生物發(fā)酵產(chǎn)物等輔助調(diào)節(jié)血脂活性成分進行高通量篩選。該平臺為降脂藥物和降血脂保健品的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
　　 ⑶對醋粉水溶性組分進行分離純化首次獲得兩個外環(huán)二肽，經(jīng)波譜技術(shù)鑒定為3-異丁基-六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-1，4-二酮和3-苯丙基-六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-

5、1，4-二酮。對醋粉中小分子物質(zhì)進行提取、分離純化，經(jīng)現(xiàn)代色譜技術(shù)(硅膠柱色譜，LH-20，Sephadex G-15，HPLC-ODS)及重結(jié)晶分離純化后，運用波譜技術(shù)(MS，ESI，NMR)鑒定出9個組分，分別為2-甲基-3-羥基-γ-吡喃酮、川芎嗪、2-羥基-3-苯基丙酸甲酯、對羥基苯丙酸甲酯、丁香酸、2-乙氨基丙氨基-2-乙酸丁酯、5-乙?；奏?2，4，6(1H，3H，5H)-三酮、L-環(huán)絲氨酸、哌嗪。
　　 ⑷建立了

6、食醋和醋粉中乙偶姻、川芎嗪同步快速檢測方法。檢測限：乙偶姻為5.625μg/mL，川芎嗪為0.033μg/mL；定量限：乙偶姻為18.750μg/mL，川芎嗪為0.111μg/mL；檢測線性范圍：乙偶姻為0.02-20 mg/L，川芎嗪為0.12-80μg/mL，相關(guān)系數(shù)均大于0.9999；準確性：乙偶姻平均回收率為96.03％，川芎嗪平均回收率為92.06％；精密度：對同一樣品進行多次測定得到方法的精密度RSD<2％。該檢測方法操作簡

7、便快速，樣品前處理簡單、科學(xué)有效。利用該方法檢測了36種市售食醋，發(fā)現(xiàn)不同食醋樣品中乙偶姻和川芎嗪的含量存在較大的差異；食醋中乙偶姻和川芎嗪含量存在顯著的正相關(guān)。該方法還適用于乳制品、飲料等其它食品尤其是發(fā)酵制品的日常檢測和監(jiān)控。另外，還建立了外環(huán)二肽3-苯丙基-六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-1，4-二酮的快速檢測方法。該方法簡便快捷，準確性高，重復(fù)性較好。為進一步的食醋及其制品中外環(huán)二肽的研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 ⑸醋粉富含多酚

8、和黃酮類化合物等抗氧化成分，其水溶性組分具有較好的自由基清除能力。細胞實驗證實，醋粉組分能清除細胞中ROS，降低細胞中MDA水平，減少細胞氧化損傷、保護細胞。醋粉組分具有抑制脂肪酶活性的作用，分子量大于10kDa組分抑制作用最強。醋粉中分離純化各組分能不同程度的體外抑制膽汁膠束形成，表明醋粉組分可以抑制膽固醇的吸收。
　　 ⑹從醋粉中分離純化得到的川芎嗪和外環(huán)二肽，經(jīng)細胞實驗結(jié)果表明具有較好的抗氧化能力，能顯著清除細胞中ROS和