蛋白質(zhì)酶法制膠應(yīng)用及膜污染分析.pdf

1、為了探究蛋白質(zhì)交聯(lián)形成的水凝膠在組織結(jié)構(gòu)和藥物緩控釋方面的應(yīng)用，本論文利用微生物谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（MTG）交聯(lián)酪蛋白溶液形成水凝膠，以魔芋葡甘聚糖（KGM）作為助劑提高水凝膠的強(qiáng)度和穩(wěn)定性。使用SEM、FT-IR、DSC等手段研究水凝膠的多尺度結(jié)構(gòu)。通過(guò)成膠過(guò)程粘度測(cè)試實(shí)驗(yàn)、水凝膠體外溶脹實(shí)驗(yàn)、體外降解實(shí)驗(yàn)等測(cè)試水凝膠吸水性能和穩(wěn)定性。進(jìn)一步以水凝膠分別包埋疏水性藥物多烯紫杉醇和親水性藥物鹽酸左氧氟沙星，考察比較了兩類藥物在該水凝膠中的緩

2、釋效果和釋放動(dòng)力學(xué)行為。
　　針對(duì)工業(yè)過(guò)程中的膜污染問(wèn)題，本論文中以牛血清蛋白（BSA）和溶菌酶為模型蛋白質(zhì)研究了超濾過(guò)程中的蛋白質(zhì)膜污染現(xiàn)象，分別考察了過(guò)程中的攪拌轉(zhuǎn)速、膜截留分子量、膜清洗再生方式和離子交換樹(shù)脂粒子對(duì)超濾過(guò)程膜通量的影響。此外，還研究了BSA和胰酶水解的酪蛋白水解物在微濾過(guò)程膜污染和聚集行為，考察了添加離子交換樹(shù)脂顆粒對(duì)膜通量的影響，利用SEC-MALLS聯(lián)用技術(shù)，對(duì)微濾前后的蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行了色譜檢測(cè)，初步考察

3、了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化。最后，使用掃描電鏡（SEM）檢測(cè)了兩種過(guò)濾前后的膜表面形貌。
　　主要結(jié)論如下：
　?。?）將KGM添加到MTG交聯(lián)的酪蛋白水凝膠中，可降低成膠時(shí)間，提高凝膠粘度；水凝膠的形成過(guò)程是水凝膠晶體化的過(guò)程；水凝膠有良好的吸水溶脹性能；KGM與酪蛋白分子之間存在氫鍵作用，提高了水凝膠在體外降解實(shí)驗(yàn)中的穩(wěn)定性。
　?。?）加入KGM的水凝膠對(duì)多烯紫杉醇和鹽酸左氧氟沙星均有良好的緩釋效果；疏水性藥物前期釋放符合

4、Fick擴(kuò)散行為，在后期仍有一定的緩釋效果，適合進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間緩釋；而親水性藥物初始釋放速率較快，符合復(fù)合型擴(kuò)散行為，后期釋放速率很小，適合進(jìn)行短時(shí)間緩釋。
　?。?）在超濾過(guò)程中，適當(dāng)提高轉(zhuǎn)速可增大膜濾通量；與膜截留分子量相仿的蛋白質(zhì)在超濾中易造成不可逆的膜污染；若蛋白質(zhì)已形成低聚集體，需用NaOH溶液清洗再生膜以提高膜壽命；離子交換樹(shù)脂粒子的加入，雖不能提高蛋白質(zhì)過(guò)濾的膜通量，卻能降低達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)所需的時(shí)間。
　?。?）在微