中性蛋白酶的固定化及其在煙用香精香料中的應用研究.pdf

1、煙用香精香料是現(xiàn)代卷煙產品的重要組成部分，目前煙用香精香料主要依靠對天然植物的提取、化學合成兩種途徑得到。由于人工合成的香料存在安全性爭議，天然植物來源的香精香料備受關注。傳統(tǒng)的提取方法雖然能夠較為全面地對植物中的致香組分進行提取，但難以避免引入植物中的蛋白質、纖維素、果膠等影響煙草吸味和香精香料表觀狀態(tài)的大分子物質，因此通過對應的酶對這類大分子物質進行降解可以提高煙用香精香料的品質。由于酶的化學本質是蛋白質，游離酶在參與酶解特定大分子

2、底物的過程中也同時對煙用香精香料產生污染，固定化酶在這方面的優(yōu)越性可以很好解決這一矛盾。本文制備了不同氧化度的海藻酸鈉凝膠以及幾種磁性復合二氧化硅載體，評價了固定在這些載體中性蛋白酶的酶學性能，初步考察了其處理墨旱蓮提取物的工藝。本論文的主要工作為：
　　 (1)合成了一系列不同氧化度的部分氧化改性海藻酸鈉凝膠，并研究了它們共價固定化中性蛋白酶的效果。結果表明：固定化Ph，載體氧化度，給酶量等因素對酶的固定化指標有著較大的影響。

3、
　　 (2)以磁性四氧化三鐵表面上3-氨丙基三乙氧基硅氧烷和正硅酸乙酯之間簡單聚合反應為基礎，通過戊二醛交聯(lián)和丙烯酸甲酯接枝制備了幾種磁性復合二氧化硅載體。其中經戊二醛交聯(lián)的載體固定化效果最好，最佳固定化條件為：0.5％戊二醛用量為30 Ml，交聯(lián)時間為2 小時；加酶量為15mg/0.1g 載體，固定化時間為50min。
　　 所得到的固定化酶活力達2500U/g 載體。
　　 (3)以墨旱蓮提取物作為酶解底物