食品和飼料中主要違禁藥物分子印跡聚合物的制備及應(yīng)用研究.pdf

1、樣品前處理技術(shù)一直是食品和飼料中違禁藥物殘留檢測(cè)研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)，發(fā)展簡(jiǎn)單、高效的樣品前處理技術(shù)，對(duì)違禁藥物殘留進(jìn)行選擇性富集、純化，提高檢測(cè)靈敏度，已成為當(dāng)前國(guó)內(nèi)外食品安全檢測(cè)技術(shù)的重要發(fā)展方向之一。固相萃取(SPE)和免疫親和色譜(IAC)是目前使用最廣泛的常規(guī)樣品前處理技術(shù)。然而，前者目標(biāo)物與吸附劑之間的作用力是非特異性的，限制了其進(jìn)一步的發(fā)展；后者所用填料為抗體，其制備過程繁瑣、價(jià)格昂貴，需要在低溫下保存，這些不利因素嚴(yán)重阻礙了

2、IAC的廣泛應(yīng)用?；诜肿佑≯E聚合物的分子印跡固相萃取(MISPE)技術(shù)，具有高特異性與高選擇性、制備簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好和可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)，已成為近年來分子印跡技術(shù)最具應(yīng)用前景的一個(gè)領(lǐng)域。本文對(duì)分子印跡聚合物(MIPs)的基本原理、研究及應(yīng)用現(xiàn)狀等進(jìn)行了較為全面的綜述，對(duì)存在的問題和發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了分析和展望。在此基礎(chǔ)上，主要針對(duì)利血平、氯霉素和氨芐青霉素等食品中主要違禁藥物，研制其MIPs納米結(jié)構(gòu)材料，并在食品安全檢測(cè)中應(yīng)用，在以下幾個(gè)方面

3、取得重要研究結(jié)果： 1.采用本體聚合法以甲基丙烯酸(MAA)為功能單體合成了利血平特異的MIPs。平衡結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明功能單體與模板比例為4:1時(shí)合成的MIPs具有最好的印跡效果。進(jìn)一步通過色譜實(shí)驗(yàn)對(duì)其選擇性能和色譜行為進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照聚合物(NIPs)相比，MIPs對(duì)利血平具有更好的選擇性能和色譜行為；通過紫外光譜、核磁共振波譜、比表面積分析和色譜等方法，系統(tǒng)研究了模板分子利血平與功能單體之間的自組裝過程，證明了利血平-N

4、H-基團(tuán)中氫質(zhì)子與功能單體在預(yù)聚合溶液中具有較強(qiáng)的相互作用，而且利血平分子中叔胺結(jié)構(gòu)周圍的質(zhì)子也表現(xiàn)出了顯著的位移變化，表明叔胺結(jié)構(gòu)在印跡和識(shí)別過程中也具有重要的作用；在此基礎(chǔ)上，通過對(duì)分子印跡固相萃取條件的優(yōu)化，建立了飼料中利血平快速、準(zhǔn)確的提取和檢測(cè)方法，對(duì)飼料中三個(gè)濃度水平(0.50，1.00和5.00μg/g)的回收率都超過80％。 2.采用水相懸浮聚合法制備了氯霉素特異的分子印跡聚合物微球(MIPMs)，克服了采用經(jīng)典

5、本體聚合法獲得MIPs后，需經(jīng)研碎、過篩等處理，才能得到所需粒徑的分子印跡聚合物顆粒，而且通常存在得率低、顆粒形狀不規(guī)則、分散性差和研磨過程中易導(dǎo)致MIPs的分子識(shí)別與選擇性下降等缺點(diǎn)。結(jié)果表明，以甲基丙烯酸N，N-二乙基氨基乙酯(DEAEM)為功能單體，模板分子與功能單體比例為1:4時(shí)合成的MIPMs對(duì)氯霉素具有較好的特異選擇性。通過MISPE比較了MIPMs對(duì)氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的特異選擇性，結(jié)果表明MIPMs對(duì)氯霉素表現(xiàn)出

6、最高的特異性(53.1％)。同時(shí)通過高效液相色譜實(shí)驗(yàn)對(duì)MISPE對(duì)實(shí)際樣品的富集和純化效果進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，當(dāng)牛奶和蝦樣品中氯霉素濃度為5μg/kg時(shí)，其回收率分別為92.7％和84.9％，RSD分別為2.7％和3.4％，樣品中的氯霉素獲得了顯著的分離、純化效果。進(jìn)一步將氯霉素MISPE與HPLC-MS/MS相結(jié)合，對(duì)蜂蜜中氯霉素殘留進(jìn)行定量分析，檢測(cè)限可達(dá)0.1μg/kg，符合目前國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中檢測(cè)限量要求(0.3μg/kg)。

7、 3.通過懸浮聚合法，獲得了氨芐青霉素特異的MIPMs。結(jié)果表明，采用DEAEM作為功能單體，模板分子與功能單體比例為1:8時(shí)合成的氨芐青霉素MIPMs具有最好的印跡效果。進(jìn)一步通過色譜實(shí)驗(yàn)對(duì)氨芐青霉素及其結(jié)構(gòu)類似物青霉素V、苯唑西林和阿莫西林在MIPMs中的色譜行為和印跡效果進(jìn)行研究，結(jié)果表明，MIPMs對(duì)氨芐青霉素具有最好的印跡效果，其印跡因子分別為3.75、3.21、3.08和2.83。紫外光譜分析表明氨芐青霉素與DEAEM在水