

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、凝乳酶最初發(fā)現(xiàn)于未斷奶小牛的第四胃,是乳酪制造業(yè)中的關(guān)鍵性酶,同時在其他食品、醫(yī)藥、輕工業(yè)等領域都有應用,其在酶工業(yè)中所占的產(chǎn)值比例高達15%。近年來由于全球性小牛短缺,人們逐漸將目光投向牛凝乳酶的代用品,其中,微生物凝乳酶以其優(yōu)秀的凝乳性狀和便捷的生產(chǎn)工藝受到了最廣泛的關(guān)注。英、美、荷、日等國率先開始了微生物凝乳劑的相關(guān)研究,我國在80年代初亦開始進行相關(guān)研究,但目前還缺乏形成產(chǎn)業(yè)化的凝乳酶生產(chǎn)工藝,生產(chǎn)乳酪所需的凝乳酶主要依賴于進口
2、,因此進行凝乳酶的相關(guān)研究具有較高的經(jīng)濟和社會意義。本文主要進行了微生物發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶的相關(guān)研究,內(nèi)容包括:凝乳酶高產(chǎn)菌株的誘變選育,發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化以及產(chǎn)物分離方法和酶學活性的初步研究。
誘變實驗以購自ATCC的米黑毛霉、購自CICC的黑曲霉為出發(fā)菌株,分別對其依次進行紫外線照射誘變、脫氧膽酸鈉誘變和常壓低溫等離子體誘變。以產(chǎn)物凝乳活性和非特異性蛋白水解活性為考量標準,通過平板初篩和搖瓶發(fā)酵復篩,最后選育
3、一株凝乳酶產(chǎn)量高,蛋白質(zhì)水解活力小的黑曲霉突變株L-2-12。以該菌株作為發(fā)酵生產(chǎn)菌株,產(chǎn)物中凝乳酶產(chǎn)量是原始黑曲霉菌株的4.28倍;是原始米黑毛霉菌株的3.39倍。遺傳穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明,該誘變株基本保持產(chǎn)酶性狀穩(wěn)定。后續(xù)實驗以該菌株作為研究對象,試驗菌株使用干燥沙土管法低溫保存。
微生物發(fā)酵是一個復雜的生理生化過程,不同菌株處于不同營養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)條件下,菌體的代謝均會不同從而影響產(chǎn)酶,因此要提高酶產(chǎn)量,對發(fā)酵產(chǎn)酶的條件
4、進行優(yōu)化是必不可少的一環(huán)。經(jīng)過對發(fā)酵培養(yǎng)基營養(yǎng)組分和培養(yǎng)條件的單因素分析和發(fā)酵條件的Box-Behnken實驗研究,本文最終確立的培養(yǎng)條件為:每250mL錐形瓶分裝9g麩皮、1g面粉、0.1g脫脂乳粉,用15mL酸性無機離子營養(yǎng)液(按質(zhì)量體積比配制0.7%MgSO4·7H2O、0.9%FeSO4·7H2O、0.1%脯氨酸溶液,加0.2NHCl調(diào)節(jié)pH至6.61)浸潤,混勻并高溫滅菌,待涼后接種,37℃培養(yǎng)98h。經(jīng)過一系列優(yōu)化,發(fā)酵產(chǎn)物
5、濃縮凍干后的凝乳酶活性最高可達21000SU。
另外,實驗對從發(fā)酵產(chǎn)物中分離純化凝乳酶粗酶的方法進行了初步探索。凝乳酶在水溶液中不穩(wěn)定極易降解,因此初提取時,在充分發(fā)酵后即以水為溶劑,使用三步固液反相接觸萃取法從固體培養(yǎng)基中萃取出發(fā)酵產(chǎn)物,經(jīng)過離心過濾后,迅速通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方式濃縮粗酶液,凍干成粗酶粉。通過此方法得到粗酶粉設備簡單、便于操作且收率較高,適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
對凝乳酶粗產(chǎn)品進行酶學性質(zhì)的
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 果膠酶高產(chǎn)菌株的激光誘變選育及液態(tài)發(fā)酵條件研究.pdf
- D-乳酸高產(chǎn)菌株的誘變選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- 中性蛋白酶高產(chǎn)菌株的誘變選育及發(fā)酵條件研究.pdf
- 堿性蛋白酶高產(chǎn)誘變菌株的選育及發(fā)酵工藝研究.pdf
- 鬼臼毒素高產(chǎn)菌株的誘變選育及發(fā)酵條件的研究.pdf
- 1,3-丙二醇高產(chǎn)菌株的誘變選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 高產(chǎn)菊粉酶菌株的誘變選育及其酶的固定化.pdf
- 20796.植酸酶高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化
- 復合誘變選育β-葡聚糖酶高產(chǎn)菌株及其酶學性質(zhì)的研究.pdf
- 丙酮酸高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵條件研究.pdf
- 蹄甲角蛋白酶高產(chǎn)菌株的誘變選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- Nisin高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- 磷脂酶D高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 激光誘變選育果膠酶高產(chǎn)菌株
- 油脂高產(chǎn)菌株的誘變選育.pdf
- D-核糖高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵條件的研究.pdf
- 高產(chǎn)谷胱甘肽菌株的選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- Monacolin K高產(chǎn)菌株選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化研究.pdf
- 角蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 高產(chǎn)蛋白菌株重離子誘變選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化和應用研究.pdf
評論
0/150
提交評論