高產(chǎn)蛋白菌株重離子誘變選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化和應(yīng)用研究.pdf

1、產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)在工業(yè)中是一種較為重要的微生物，常被用于生產(chǎn)多種有用的生物物質(zhì)，它被美國的FDA認(rèn)證為可作為食品添加劑的酵母，在許多國家允許直接用作牲畜飼料。近年來產(chǎn)朊假絲酵母在發(fā)酵法生產(chǎn)蛋白飼料和秸稈飼料中被廣泛應(yīng)用，是飼料生產(chǎn)中用途最為廣泛的微生物菌種之一。
　　本研究以產(chǎn)朊假絲酵母(編號GSICC-50350)為出發(fā)菌株，采用重離子輻射誘變育種技術(shù)，對產(chǎn)朊假絲酵母菌株進行誘變選育;通過對誘變后的產(chǎn)

2、朊假絲酵母菌株的篩選和生長條件、發(fā)酵條件的優(yōu)化，得到了一株產(chǎn)蛋白含量較高，性能穩(wěn)定的菌株，希望應(yīng)用在工農(nóng)業(yè)廢棄物及農(nóng)副產(chǎn)品下腳料生產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料中。研究結(jié)果如下:
　　1、利用重離子輻照對產(chǎn)朊假絲酵母菌(編號GSICC-50350)進行誘變，并從中篩選出正突變菌株，得到重離子誘變的最適誘變方式為離子注入輻照和最適劑量為40Gy;誘變后的菌體生物量和蛋白質(zhì)含量普遍較高，為進一步利用重離子輻照誘變產(chǎn)朊假絲酵母提供了一定的理論依據(jù)。

3、>　　2、通過篩選得到了產(chǎn)蛋白質(zhì)量較高的菌株一株，編號為Y-2-B，其蛋白質(zhì)含量達到38.26％，比誘變前的19.99％提高了41.3％;對此菌種進行穩(wěn)定性測試（傳代9次并進行蛋白質(zhì)測定），性狀穩(wěn)定。
　　3、對產(chǎn)朊假絲酵母Y-2-B菌株的最適培條件進行了研究，確定了培養(yǎng)基最佳碳源、氮源、無機鹽及其添加比例;通過單因素試驗及正交試驗對其發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。結(jié)果表明，該菌株的最佳發(fā)酵條件為:培養(yǎng)培養(yǎng)溫度30℃、搖床轉(zhuǎn)速為180 r/

4、min、接種量為10％、發(fā)酵時間為32h時，其發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)含量最高，蛋白質(zhì)含量為42.2％。
　　4、以產(chǎn)朊假絲酵母Y-2-B為出發(fā)酵菌株，復(fù)合黑曲霉、熱帶假絲酵母和釀酒酵母，采用分步固態(tài)發(fā)酵果渣生產(chǎn)菌體蛋白飼料。通過單因素試驗及正交試驗對發(fā)酵物料的固液比、酸堿度、溫度、接種量、多菌種分階段接種培養(yǎng)及共發(fā)酵時間進行了優(yōu)化研究，確定最佳發(fā)酵條件為:m料∶V水=60％，初始pH5.5，溫度30℃，黑曲霉的接種量7.5％，復(fù)合酵母液