小劑量放射治療對(duì)比格犬脊髓損傷后反應(yīng)性膠質(zhì)增生的影響和機(jī)制研究.pdf

1、目的:星形膠質(zhì)細(xì)胞在脊髓損傷(spinalcordinjury,SCI)后被大量激活并釋放多種致炎因子而加重機(jī)體的炎性損傷,促進(jìn)神經(jīng)元的凋亡。由于星形膠質(zhì)細(xì)胞為可分裂細(xì)胞,其活化增殖受著細(xì)胞周期的密切調(diào)控。本研究試圖探討小劑量放射治療對(duì)脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化增殖及相關(guān)炎癥反應(yīng)的影響,為細(xì)胞周期調(diào)控在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Centralnervoussystem,CNS)的進(jìn)一步研究應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為假手術(shù)組、

2、脊髓損傷組和小劑量放射治療組,建立脊髓半切損傷模型,分別于損傷后3d、6d、14d、30d和60d處死,剝離受損段脊髓并計(jì)算組織含水量,利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化增殖情況,利用westernblot技術(shù)檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白GFAP、Ki67的表達(dá)水平變化,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期的變化,利用TUNEL技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)元凋亡變化,利用尼氏染色計(jì)數(shù)脊髓灰質(zhì)前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)目。
　　結(jié)果:假手

3、術(shù)組中星形膠質(zhì)細(xì)胞多處于靜息狀態(tài)(胞體纖細(xì),突起細(xì)長(zhǎng)),僅見零星散在的Ki67陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞,星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白(GFAP和Ki67)的表達(dá)較弱,89±5.68％的星形膠質(zhì)細(xì)胞處于G0/G1期,5±0.85%處于S期,5±1.67%處于G2/M期,神經(jīng)元凋亡數(shù)目少,脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元計(jì)數(shù)53±2.35%;脊髓損傷組Ki67陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞密度20±9.82%,星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白(GFAP和Ki67)的表達(dá)增強(qiáng),72±5.6

4、8%的星形膠質(zhì)細(xì)胞處于G0/G1期,18±1.02%處于S期,9±2.44%處于G2/M期,脊髓組織水腫明顯,含水量可達(dá)75±8.99%,神經(jīng)元凋亡數(shù)目增多,脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元計(jì)數(shù)20±2.00%;給予小劑量放射治療后可以抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活化增殖,Ki67陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞密度5±2.42%,星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白(GFAP和Ki67)的表達(dá)增強(qiáng),85±3.54%的星形膠質(zhì)細(xì)胞處于G0/G1期,6±0.99%處于S期,6±0.82%處于