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文檔簡介
1、目的:通過Allen打擊法建立SD大鼠急性脊髓損傷動物模型,觀察P2X7受體阻斷劑BBG與小劑量甲潑尼龍聯(lián)合應(yīng)用對實驗性脊髓損傷大鼠的運(yùn)動功能恢復(fù)情況、神經(jīng)保護(hù)作用并與大劑量甲潑尼龍對比。
方法:1.實驗動物分組:52只成年雄性S-D大鼠隨機(jī)分為五組:A組:假手術(shù)組、B組:創(chuàng)傷對照組、C組:BBG組、D組:大劑量甲潑尼龍組和E組:BBG+小劑量甲潑尼龍組。
2.建立大鼠脊髓損傷動物模型:麻醉狀態(tài)下,顯露大鼠T10節(jié)段
2、脊髓,用10g的打擊桿從12.5mm高度自由落體,撞擊T10節(jié)段脊髓,造成急性脊髓損傷。
3.觀察項目:(1)分別在脊髓損傷后第1天、3天、7天、14天、21天、28天、42天應(yīng)用BBB評分評價大鼠運(yùn)功功能的改變;(2)分別于脊髓損傷后第3天、42天灌流取脊髓,HE染色觀察脊髓組織病理改變,LFB染色觀察脊髓殘余白質(zhì)面積;(3)免疫組織化學(xué)法檢測GFAP陽性細(xì)胞改變。
結(jié)果:1.A組(假手術(shù)組)大鼠術(shù)后BBB評分為2
3、1分,與術(shù)前沒有改變;其余4組大鼠脊髓損傷后1d天BBB評分均為0分,以后各組大鼠BBB評分有不同程度的恢復(fù),到脊髓損傷后42天時各組大鼠BBB評分為B組(創(chuàng)傷對照組)8.25±0.957、C組(BBG組)10.67±0.816、D組(大劑量甲潑尼龍組)12.00±0.632、E組(BBG+小劑量甲潑尼龍組)12.50±0.837,C、D、E組與B組相比BBB評分有明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01),且E組BBB評分最高;D、E組與C組相比
4、BBB評分有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),D、E組間BBB評分未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)
2.HE染色觀察:脊髓損傷后3天,損傷區(qū)脊髓結(jié)構(gòu)紊亂,彌漫性出血、水腫,灰白質(zhì)分界不清,大量炎性細(xì)胞浸潤,以單核或多核細(xì)胞為主,各組病理改變差異不明顯。脊髓損傷后第42天,各組損傷區(qū)脊髓組織可見不同程度的修復(fù)改變,中央灰質(zhì)可見空腔形成。其中,D組(大劑量甲潑尼龍組)、E組(BBG+小劑量甲潑尼龍組)修復(fù)程度明顯好于B組(創(chuàng)傷對照組)
5、、C組(BBG組)。
3.LFB染色觀察:手術(shù)后42天,A組(假手術(shù)組)大鼠光鏡下見脊髓白質(zhì)呈均勻的藍(lán)染,未見脫髓鞘改變,手術(shù)中心脊髓殘余白質(zhì)面積為2.175±0.050mm2。剩余各組脊髓損傷后42天損傷中心脊髓均有不同程度的脫髓鞘改變,白質(zhì)藍(lán)染區(qū)域不同程度的減少,可見淡染區(qū)域,其中B組(創(chuàng)傷對照組)大鼠脊髓殘余白質(zhì)面積最少,D組(大劑量甲潑尼龍組)、E組(BBG+小劑量甲潑尼龍組)尚有較多的白質(zhì)殘留,C、D、E組與B組相比
6、具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),C組與D、E組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),而D、E組間未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)
4.GFAP免疫組織化學(xué)觀察:在大鼠脊髓損傷后3天,各組大鼠損傷區(qū)脊髓GFAP陽性細(xì)胞有不同程度的增加,其中B組(創(chuàng)傷對照組)大鼠損傷區(qū)脊髓可見大量GFAP陽性細(xì)胞,C組(BBG組)、D組(大劑量甲潑尼龍組)、E組(BBG+小劑量甲潑尼龍)與A組(假手術(shù)組)相比GFAP陽性細(xì)胞雖有增加,但不如B組明
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