BBG聯(lián)合小劑量甲潑尼龍治療大鼠脊髓損傷的實驗研究.pdf

1、目的:通過Allen打擊法建立SD大鼠急性脊髓損傷動物模型，觀察P2X7受體阻斷劑BBG與小劑量甲潑尼龍聯(lián)合應用對實驗性脊髓損傷大鼠的運動功能恢復情況、神經(jīng)保護作用并與大劑量甲潑尼龍對比。
　　方法:1.實驗動物分組:52只成年雄性S-D大鼠隨機分為五組:A組:假手術組、B組:創(chuàng)傷對照組、C組:BBG組、D組:大劑量甲潑尼龍組和E組:BBG+小劑量甲潑尼龍組。
　　2.建立大鼠脊髓損傷動物模型:麻醉狀態(tài)下，顯露大鼠T10節(jié)段

2、脊髓，用10g的打擊桿從12.5mm高度自由落體，撞擊T10節(jié)段脊髓，造成急性脊髓損傷。
　　3.觀察項目:(1)分別在脊髓損傷后第1天、3天、7天、14天、21天、28天、42天應用BBB評分評價大鼠運功功能的改變;(2)分別于脊髓損傷后第3天、42天灌流取脊髓，HE染色觀察脊髓組織病理改變，LFB染色觀察脊髓殘余白質面積;(3)免疫組織化學法檢測GFAP陽性細胞改變。
　　結果:1.A組（假手術組）大鼠術后BBB評分為2

3、1分，與術前沒有改變;其余4組大鼠脊髓損傷后1d天BBB評分均為0分，以后各組大鼠BBB評分有不同程度的恢復，到脊髓損傷后42天時各組大鼠BBB評分為B組（創(chuàng)傷對照組）8.25±0.957、C組（BBG組）10.67±0.816、D組（大劑量甲潑尼龍組）12.00±0.632、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）12.50±0.837，C、D、E組與B組相比BBB評分有明顯統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，且E組BBB評分最高;D、E組與C組相比

4、BBB評分有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，D、E組間BBB評分未見明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)
　　2.HE染色觀察:脊髓損傷后3天，損傷區(qū)脊髓結構紊亂，彌漫性出血、水腫，灰白質分界不清，大量炎性細胞浸潤，以單核或多核細胞為主，各組病理改變差異不明顯。脊髓損傷后第42天，各組損傷區(qū)脊髓組織可見不同程度的修復改變，中央灰質可見空腔形成。其中，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）修復程度明顯好于B組（創(chuàng)傷對照組）

5、、C組（BBG組）。
　　3.LFB染色觀察:手術后42天，A組（假手術組）大鼠光鏡下見脊髓白質呈均勻的藍染，未見脫髓鞘改變，手術中心脊髓殘余白質面積為2.175±0.050mm2。剩余各組脊髓損傷后42天損傷中心脊髓均有不同程度的脫髓鞘改變，白質藍染區(qū)域不同程度的減少，可見淡染區(qū)域，其中B組（創(chuàng)傷對照組）大鼠脊髓殘余白質面積最少，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）尚有較多的白質殘留，C、D、E組與B組相比

6、具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，C組與D、E組相比具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，而D、E組間未見明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)
　　4.GFAP免疫組織化學觀察:在大鼠脊髓損傷后3天，各組大鼠損傷區(qū)脊髓GFAP陽性細胞有不同程度的增加，其中B組（創(chuàng)傷對照組）大鼠損傷區(qū)脊髓可見大量GFAP陽性細胞，C組（BBG組）、D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍）與A組（假手術組）相比GFAP陽性細胞雖有增加，但不如B組明