TNFAIP3在尿路上皮乳頭狀癌組織中表達(dá)與臨床意義的研究.pdf

1、目的：
　　通過檢測(cè)腫瘤壞死因子a誘導(dǎo)蛋白3(tumor necrosis factor，alpha-induced protein3，TNFAIP3)mRNA及其蛋白在膀胱尿路上皮乳頭狀癌(urothelial papillary carcinoma，UPC)組織中的表達(dá)情況，探討其在膀胱癌發(fā)生，發(fā)展中的作用。尋找與膀胱腫瘤發(fā)生，發(fā)展相關(guān)的分子標(biāo)記物，從而為膀胱腫瘤的診斷、治療及預(yù)后判斷等提供新的思路。
　　方法：

2、　　1.根據(jù)Genebank中的TNFAIP3 mRNA的參考序列(NM_006290.2)，設(shè)計(jì)上下游引物，采用SYBR GreenⅠ熒光定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-RT-PCR)檢測(cè)62例膀胱UPC組織及20例正常膀胱組織中TNFAIP3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量，以GAPDHmRNA為內(nèi)參進(jìn)行校正，用TNFAIP3 mRNA/GAPDH mRNA比值來表示TNFAIP3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量，采用2-△Ct方法計(jì)算，△Ct=CtTNF

3、AIP3 mRNA-CtGAPDH mRNA。
　　2.采用免疫組化Envision法檢測(cè)62例膀胱UPC組織及20例正常膀胱組織中TNFAIP3蛋白的表達(dá)情況。
　　3.用統(tǒng)計(jì)軟件分析膀胱UPC組織中TNFAIP3 mRNA及其蛋白的表達(dá)情況與正常膀胱組織是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，ROC曲線對(duì)TNFAIP3 mRNA診斷UPC的價(jià)值進(jìn)行分析，同時(shí)對(duì)TNFAIP3 mRNA及其蛋白的診斷性能評(píng)價(jià)進(jìn)行比較，并結(jié)合患者的臨床資料分析TN

4、FAIP3的表達(dá)與UPC臨床參數(shù)的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.膀胱組織中TNFAIP3 mRNA的表達(dá)情況：實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)TNFAIP3mRNA在62例UPC組織和20例正常膀胱組織中均有表達(dá)，其相對(duì)表達(dá)量分別為3.29×10-4(0.54×10-4～16.60×10-4)，0.46×10-4(0.17×10-4～0.90×10-4)，UPC組織中的表達(dá)水平高于正常膀胱組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.729，P

5、<0.05)。
　　2.膀胱組織中TNFAIP3蛋白的表達(dá)情況：免疫組化法檢測(cè)62例UPC組織和20例正常膀胱組織TNFAIP3蛋白的表達(dá)情況，UPC組織陽性表達(dá)率75.8％(47/62)，正常組織陽性表達(dá)率0％(0/20)，UPC組織中蛋白的表達(dá)比正常組織明顯增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=39.601，P<0.05)。
　　3.TNFAIP3 mRNA及其蛋白診斷UPC的性能評(píng)價(jià)：ROC曲線分析結(jié)果顯示：當(dāng)TNFAIP3

6、 mRNA/GAPDH mRNA×10-4的臨界值為0.89時(shí)，曲線下面積ROC-AUC=0.811。通過TNFAIP3 mRNA及其蛋白對(duì)UPC的診斷性能評(píng)價(jià)的比較顯示：TNFAIP3 mRNA的診斷靈敏度低于TNFAIP3蛋白(72.6％vs91.9％)，但其特異度較高(85.0％vs65.0％)。
　　4.TNFAIP3的表達(dá)與UPC患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系：TNFAIP3 mRNA及其蛋白在UPC組織中的表達(dá)水平與患者腫瘤的