血漿纖維蛋白原檢測質控物的研制與評價.pdf

1、目的:為了進一步提高臨床實驗室纖維蛋白原檢測結果的重復性和可比性,改變纖維蛋白原檢測室內質控以及室間質量評價所用的質控物濃度水平較為單一的現(xiàn)狀,促進纖維蛋白原檢測的標準化,我們研制了多個濃度水平的纖維蛋白原質控物。
　　 方法:1.質控物的研制:對不同的制備方法和制備過程中的關鍵影響因素進行研究和分析,選擇合適的制備方法和實驗條件制訂最佳制備方案,制備了5個批號3個濃度水平(2個異常低值、1個正常水平、2個異常高值)的質控物。2

2、.制備物的評價:(1)參照《中國生物制品檢定規(guī)程》的相關要求對制備物的外觀性狀、殘水量和復溶性進行評價。(2)參照CNAS-GL03《能力驗證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》及ISO Guide35《標準物質/標準樣品的定值—通用原則和統(tǒng)計原理》對制備物的均勻性和穩(wěn)定性進行評價。①均勻性評價:每批號制備物隨機抽取10支進行檢測,每支重復檢測2次,檢測結果進行單因素方差分析并計算均勻性不確定度。②穩(wěn)定性評價:對制備物置于冷藏(4℃～8℃)、室

3、溫(22℃～26℃)和37℃三種條件下的穩(wěn)定性、制備物復溶后使用并置于冷藏和室溫條件下的復溶穩(wěn)定性以及將制備物置于冷藏條件下儲存的長期穩(wěn)定性進行評價,對長期穩(wěn)定性評價檢測結果進行一元線性回歸分析并計算長期穩(wěn)定性不確定度；在進行每種穩(wěn)定性評價時,同時使用商品質控物作為對照。3.制備物的試應用:(1)將制備物試用于Sysmex CA1500全自動凝血分析儀FIB檢測的室內質量控制,同時檢測商品質控物作為對照。(2)將制備物(批號為20111

4、6S、201117S)與商品質控物(批號為201111～201115)同步發(fā)放進行室間質量評價調查,回報結果參照室間質評方案進行分析,以了解制備物用于室間質量評價的可行性。
　　 結果:
　　 1.質控物的研制:選取人新鮮冰凍血漿為原料,采用低溫乙醇沉淀法分離提取纖維蛋白原,將其加入正常血漿或乏纖維蛋白原血漿中,經穩(wěn)定化處理后配制成5個批號3個濃度水平的纖維蛋白溶液,然后分裝成1ml/瓶并進行冷凍干燥,最終制備出5個批號

5、的質控物(批號分別為20101011、20101012、20101013、20101014、20101015)。
　　 2.制備物的評價:(1)制備物的外觀性狀符合要求,復溶性良好,殘水量分布范圍為1.79％～1.97％。(2)均勻性和穩(wěn)定性評價:①均勻性評價結果顯示,5個批號制備物的樣品內和樣品間FIB檢測結果差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；制備物與商品質控物的均勻性檢測結果的變異系數(shù)(CV)范圍分別為1.7％～3.4％和2

6、.7％,均小于儀器檢測批內不精密度的允許限(4％)以及基于生物學變異的允許不精密度(5.4％)；5個批號制備物的FIB均勻性不確定度范圍為0.009g/L～0.085g/L,分別小于對應的方法重復性測量的不確定度0.019g/L～0.180g/L。②穩(wěn)定性評價結果顯示,各批號制備物置于室溫條件下14天內檢測較冷藏條件檢測結果的偏差范圍為-5.2％～2.1％,而置于37℃條件下3天內檢測較冷藏條件檢測結果的偏差范圍為-33.0％～6.4％

7、；制備物復溶后置于冷藏條件12h內檢測較立即檢測的結果偏差為-1.2％～4.5％,而置于室溫條件下3h和6h時檢測較立即檢測的結果偏差分別為-3.8％～1.5％和-7.8％～5.4％;20101011、20101012、20101014和20101015批號制備物置于冷藏條件在32周內的穩(wěn)定性檢測結果隨著保存時間無線性趨勢變化(P>0.05),而20101013批號制備物置于冷藏條件僅在24周內的穩(wěn)定性檢測結果隨著保存時間無線性趨勢變化

8、(P>0.05)；穩(wěn)定期內5個批號制備物與商品質控物FIB的長期穩(wěn)定性不確定度范圍分別為0.009g/L～0.066g/L和0.033g/L,分別小于對應的方法重復測量的不確定度。
　　 3.制備物的試應用:①室內質控試應用結果顯示,5個批號制備物在Sysmex CA1500上3個月內每次檢測的結果均在均值±3s范圍之內,日間不精密度(CVbetween)范圍為1.8％～5.8％,商品質控物的CVbetween為3.0％。②室間

9、質量評價調查結果顯示,201116S和201117S批號制備物各組別檢測結果的變異系數(shù)分別6.2％～16.0％和4.7％～19.2％,及格率范圍分別為71.4％～96.3％和70.6％～97.0％；商品質控物的各組別檢測結果的變異系數(shù)和及格率分別為3.6％～18.0％和55.0％～100％。
　　 結論:摸索出了制備纖維蛋白原質控物的合適方法和實驗條件,能夠制備出濃度水平可控的纖維蛋白原質控物。制備的5個批號質控物具有合格的外觀