黑果枸杞色素研究.pdf

1、黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)是茄科枸杞屬多年生耐鹽、抗旱植物，分布于我國(guó)西北地區(qū)，其成熟漿果中富含紫紅色色素，屬于典型的天然花色苷類(lèi)植物色素資源。為使我國(guó)西部特色植物資源盡快向經(jīng)濟(jì)轉(zhuǎn)化，給發(fā)展“鹽地產(chǎn)業(yè)”提出行之有效的途徑和方法，本研究采用植物學(xué)、分子生物學(xué)、植物化學(xué)、食品衛(wèi)生學(xué)、藥理學(xué)等學(xué)科相結(jié)合的研究方法，對(duì)黑果枸杞的原植物、色素的提取精制工藝、主要化學(xué)成分類(lèi)型、穩(wěn)定性及其抗氧化、調(diào)血脂等方面作系統(tǒng)的研

2、究，最終確定黑果枸杞色素不僅可以作為天然食用色素使用，而且具有一定的生物活性。
　　 本研究首先通過(guò)野外調(diào)查結(jié)合文獻(xiàn)資料，初步推算出新疆地區(qū)鹽生植物——黑果枸杞年產(chǎn)鮮果量大約在5.44×107kg，資源量豐富。同時(shí)，測(cè)定了黑果枸杞rDNA-ITS全序列，從分子水平為該植物的鑒定提供了DNA指紋圖譜依據(jù)(已在Genbank注冊(cè)，序列號(hào)為AY880681)。
　　 為探討該資源色素提取和精制技術(shù)條件，采用單因素比較和正交實(shí)驗(yàn)

3、法，得到黑果枸杞色素的最佳提取條件為：以pH3.0的80％乙醇作浸提劑，提取溫度50℃，提取時(shí)間3 h，固液配比1：40；用X-5大孔吸附樹(shù)脂對(duì)色素進(jìn)行精制，以樹(shù)脂柱徑高比1：15、流速3mL/min、pH3.0、色素液濃度1 g/L為最佳吸附條件，色素吸附量可達(dá)0.03715 g/mL濕樹(shù)脂體積；而以95％7醇做洗脫液，在pH2.0、流速5 mL/min、3倍于柱床體積的洗脫液條件下解吸附效果最佳，色素回收率達(dá)到97.78％；制取的色

4、素產(chǎn)品外觀呈紫紅色，色價(jià)為36.7。該方法簡(jiǎn)單易行，具有很好的重復(fù)性，色素產(chǎn)率達(dá)到9.07％。
　　 在上述技術(shù)條件下制取的色素理化性質(zhì)研究表明，黑果枸杞色素(Pigment ofLycium ruthenicum Murr.，簡(jiǎn)稱(chēng)：PLR)屬花色苷類(lèi)，為水溶性色素，在酸性條件下，具有一定的耐熱性能，但耐氧化性能不佳；對(duì)室內(nèi)、外自然光與紫外光的耐受性較好；對(duì)還原劑有一定的耐受性；適用pH范圍廣，尤以酸性狀態(tài)色澤最佳；蔗糖和防腐劑

5、以及金屬離子Zn2+、Mg2+、Ca2+、K+、Na+對(duì)色素穩(wěn)定性無(wú)不良影響，而Fe2+、Fe3+、Cu2+、Al3+、Pb2+、Sn2+則隨離子濃度增加而對(duì)色素的不利影響加大。當(dāng)向色素液中加入穩(wěn)定劑(0.04％維生素B1+0.01％單寧酸+0.01％半胱氨酸)后，即可提高色素耐熱性。
　　 毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，PLR對(duì)KM小鼠的LD50大于24 g/kg·BW，說(shuō)明該受試物屬于無(wú)毒級(jí)物質(zhì)。遺傳毒性試驗(yàn)：Ames試驗(yàn)、骨髓細(xì)胞微核試

6、驗(yàn)、小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)的結(jié)果皆為陰性，未顯示出致突變性。而30天喂養(yǎng)試驗(yàn)表明，PLR在2.4g/kg、1.2 g/kg、0.24 g/kg·BW劑量時(shí)，對(duì)動(dòng)物的身體、臟器的生長(zhǎng)發(fā)育以及血液生化指標(biāo)等均無(wú)明顯不良影響。而且，色素中的有害微量元素含量均低于國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。由此說(shuō)明黑果枸杞色素具有食用安全性。
　　 在藥理學(xué)研究中體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明，PLR具有一定的抗氧化能力，表現(xiàn)出很強(qiáng)的DPPH·自由基清除活性，IC50達(dá)到0.164