黑果枸杞抗骨質(zhì)疏松活性多糖的篩選與結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、本文選用黑果枸杞為原料，經(jīng)提取工藝優(yōu)化大量制備多糖，對多糖進行逐級分離和抗骨質(zhì)疏松活性評價，篩選出抗骨質(zhì)疏松高活性均一組分多糖，并對該組分進行理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)表征解析，取得結(jié)果如下:
　　(1)黑果枸杞多糖提取工藝的優(yōu)化。在單因素試驗水平上，對料液比、提取溫度、提取時間三因素進行優(yōu)化。優(yōu)化條件為料液比為1∶20、提取溫度80℃、提取時間2h，按此條件提取黑果枸杞多糖，得率為4.51％±0.21。
　　(2)抗骨質(zhì)疏松活性組分的

2、分離純化。黑果枸杞粗多糖LRP經(jīng)DEAE-Cellulose層析柱分離后得到四個不同組分多糖，分別為水洗糖LRPW、0.1M鹽洗糖LRP1、0.2M鹽洗糖LRP2、0.3M鹽洗糖LRP3。經(jīng)活性評價，LRP2活性最好，進一步采用Sephacryl S-500凝膠柱層析對活性組分進行分離純化，得到高活性均一組分多糖LRP2A。
　　(3)均一高活性組分LRP2A的理化性質(zhì)分析和結(jié)構(gòu)表征解析。通過HPLC、紅外光譜分析、單糖組成分析、

3、甲基化分析和核磁共振分析技術(shù)對LRP2A進行結(jié)構(gòu)解析，結(jié)果表明，LRP2A是一個均一組分酸性多糖，糖醛酸含量為41.8％，相對分子質(zhì)量為2.6484×106Da，單糖組成由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和半乳糖醛酸組成，摩爾比為1.00∶2.07∶0.57∶2.59∶4.33，其主鏈主要由α-(1→4)-D-GalpA、α-(1→4)-2-O-acetyl-D-GalAMe、α-(1→2,4)-L-Rhap和β-(1→4)-D-Glc