黑果枸杞內生真菌RER4次生代謝產物的研究.pdf

1、瞎壓斜技大學論文題目：黑果枸杞內生真菌RER4次生代謝產物的研究學科門類：工學一級學科：化學工程與技術培養(yǎng)單位：化學與化工學院碩士生：王鵬飛導師：馬養(yǎng)民教授2014年5月黑果枸杞內生真菌RER4次生代謝產物的研究摘要為了對黑果枸杞內生真菌進行深入研究，本課題以20株耐鹽堿黑果枸杞內生真菌中的一株抗菌活性較強的曲霉屬真菌RER4為研究對象，采用形態(tài)學鑒定方法結合分子生物學鑒定方法，鑒定出該真菌為米曲霉(Aspergillusoryzae)

2、。以大米為培養(yǎng)基，對黑果枸杞內生真菌RER4進行固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵物陰干后用石油醚、乙酸乙酯、甲醇依次進行提取，濃縮后得到粗品浸膏2059?；瘜W成分預分析結果表明，黑果枸杞內生真菌RER4次生代謝產物中含有甾體，有機酸，生物堿，內酯類等化合物。采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜及重結晶等手段進行分離純化，最終得到16個化合物。對16個化合物進行理化性質結合核磁共振、高分辨質譜等分析，確定16個化合物分別為：麥角甾醇、尿黑酸內酯、6檸檬酸甲酯、琥珀酸

3、、1，5檸檬酸二甲酯、5hydroxymethylfuran3carboxylicacid、25二羥基苯乙酸甲酯、檸檬酸、pyranonigrinsA、campyronesA、4乙酰氨基丁酸、rubrofusarinB、asperpyronesA、赤薛醇、甘露醇、阿拉伯糖醇。目前關于米曲霉化學成分的研究報道較少，尿黑酸內酯、5hydroxymethylfuran3carboxylicacid、2，5二羥基苯乙酸甲酯、pyranonigr

4、insA、campyronesA、4乙酰氨基丁酸、rubrofusatinB、asperpyronesA均為首次從米曲霉發(fā)酵物中分離得到。黑果枸杞內生真菌RER4次生代謝產物中含有多種吡喃酮衍生物，這使得RER4有望成為一株新的“工程菌”。對化合物尿黑酸內酯、2，5二羥基苯乙酸甲酯、pyranonigrinsA、rubrofusarinB、asperpyronesA做抗氧化實驗，實驗結果表明尿黑酸內酯和2，5二羥基苯乙酸甲酯對DPPH的

5、自由基清除率的IC50值與維生素C(IC。。=693lxg／mg)相當。分析5個化合物及Vc的構效關系可得知：化合物抗氧化活性和其結構上易被氧化的基團，及其所處的化學環(huán)境有關。以4株細菌(大腸桿菌，綠膿桿菌，金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌)和4株植物病原真菌(尖孢鐮孢菌，小麥赤霉病菌，蘋果樹腐爛病菌，番茄灰霉病菌)對16個化合物進行抑菌活性測試，測試結果表明：9個化合物對細菌和真菌生長表現(xiàn)出不同的抑制作用，尿黑酸內酯和2，5二羥基苯乙酸甲