黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4次生代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、瞎壓斜技大學(xué)論文題目：黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4次生代謝產(chǎn)物的研究學(xué)科門類：工學(xué)一級(jí)學(xué)科：化學(xué)工程與技術(shù)培養(yǎng)單位：化學(xué)與化工學(xué)院碩士生：王鵬飛導(dǎo)師：馬養(yǎng)民教授2014年5月黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4次生代謝產(chǎn)物的研究摘要為了對(duì)黑果枸杞內(nèi)生真菌進(jìn)行深入研究，本課題以20株耐鹽堿黑果枸杞內(nèi)生真菌中的一株抗菌活性較強(qiáng)的曲霉屬真菌RER4為研究對(duì)象，采用形態(tài)學(xué)鑒定方法結(jié)合分子生物學(xué)鑒定方法，鑒定出該真菌為米曲霉(Aspergillusoryzae)

2、。以大米為培養(yǎng)基，對(duì)黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵物陰干后用石油醚、乙酸乙酯、甲醇依次進(jìn)行提取，濃縮后得到粗品浸膏2059?；瘜W(xué)成分預(yù)分析結(jié)果表明，黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4次生代謝產(chǎn)物中含有甾體，有機(jī)酸，生物堿，內(nèi)酯類等化合物。采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜及重結(jié)晶等手段進(jìn)行分離純化，最終得到16個(gè)化合物。對(duì)16個(gè)化合物進(jìn)行理化性質(zhì)結(jié)合核磁共振、高分辨質(zhì)譜等分析，確定16個(gè)化合物分別為：麥角甾醇、尿黑酸內(nèi)酯、6檸檬酸甲酯、琥珀酸

3、、1，5檸檬酸二甲酯、5hydroxymethylfuran3carboxylicacid、25二羥基苯乙酸甲酯、檸檬酸、pyranonigrinsA、campyronesA、4乙酰氨基丁酸、rubrofusarinB、asperpyronesA、赤薛醇、甘露醇、阿拉伯糖醇。目前關(guān)于米曲霉化學(xué)成分的研究報(bào)道較少，尿黑酸內(nèi)酯、5hydroxymethylfuran3carboxylicacid、2，5二羥基苯乙酸甲酯、pyranonigr

4、insA、campyronesA、4乙酰氨基丁酸、rubrofusatinB、asperpyronesA均為首次從米曲霉發(fā)酵物中分離得到。黑果枸杞內(nèi)生真菌RER4次生代謝產(chǎn)物中含有多種吡喃酮衍生物，這使得RER4有望成為一株新的“工程菌”。對(duì)化合物尿黑酸內(nèi)酯、2，5二羥基苯乙酸甲酯、pyranonigrinsA、rubrofusarinB、asperpyronesA做抗氧化實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明尿黑酸內(nèi)酯和2，5二羥基苯乙酸甲酯對(duì)DPPH的

5、自由基清除率的IC50值與維生素C(IC。。=693lxg／mg)相當(dāng)。分析5個(gè)化合物及Vc的構(gòu)效關(guān)系可得知：化合物抗氧化活性和其結(jié)構(gòu)上易被氧化的基團(tuán)，及其所處的化學(xué)環(huán)境有關(guān)。以4株細(xì)菌(大腸桿菌，綠膿桿菌，金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌)和4株植物病原真菌(尖孢鐮孢菌，小麥赤霉病菌，蘋果樹腐爛病菌，番茄灰霉病菌)對(duì)16個(gè)化合物進(jìn)行抑菌活性測試，測試結(jié)果表明：9個(gè)化合物對(duì)細(xì)菌和真菌生長表現(xiàn)出不同的抑制作用，尿黑酸內(nèi)酯和2，5二羥基苯乙酸甲