洛伐他汀抑制人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞生長及其機(jī)制的實驗研究.pdf

1、目的： 研究洛伐他汀(Lovastatin)對結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞生長抑制和誘導(dǎo)凋亡的作用，并對洛伐他汀對結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法： 觀察不同濃度洛伐他汀(5μmol/l、10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l)對處于對數(shù)生長期的HCT-116細(xì)胞增殖的影響，并應(yīng)用MTT比色法檢測每孔吸光度值A(chǔ)值，計算對照組和各實驗組細(xì)胞的生長抑制率。應(yīng)用流式細(xì)胞儀(FCM)研

2、究洛伐他汀對結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡作用，計算細(xì)胞凋亡率。Western Blot檢測MMP9及凋亡因子bcl-2、bax蛋白表達(dá)水平的變化。RT-PCR檢測不同濃度的洛伐他汀作用于結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞MMP9在基因水平的變化。 結(jié)果： (1)MTT法顯示lovastatin可明顯抑制HCT-116細(xì)胞的生長，其效果隨著濃度的增加和作用時間的延長而明顯增強(qiáng)(P<0.01)。 (2)流式細(xì)胞術(shù)檢測

3、出HCT-116細(xì)胞經(jīng)lovastatin作用48小時后可見細(xì)胞周期明顯抑制，細(xì)胞凋亡率與lovastatin濃度呈正相關(guān)，且隨著濃度的增加HCT-116細(xì)胞周期G0/G1期細(xì)胞比例增加，S期細(xì)胞比例下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (3)Western Blot法結(jié)果顯示經(jīng)不同濃度的洛伐他汀作用于結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞48小時可使細(xì)胞中的bcl-2蛋白、MMP9表達(dá)下降，bax蛋白表達(dá)升高(P<0.01)。 (