IL-17誘導哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4+T細胞分泌IL-8.pdf

1、研究目的支氣管哮喘(哮喘)是慢性持續(xù)性氣道炎癥疾病,多種炎性細胞和炎性介質(zhì)參與其過程。目前普遍認為輔助性T淋巴細胞(CD4~+T細胞)兩種亞型Th1、Th2的失衡是哮喘發(fā)病的重要機制。近年來發(fā)現(xiàn)了一類新的CD4~+T細胞亞群,即Th17細胞,在哮喘的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。Th17細胞重要的效應因子是IL-17。IL-8是中性粒細胞趨化、聚集和活化的重要細胞因子。研究發(fā)現(xiàn)哮喘急性發(fā)作患者痰液及外周血中IL-17、IL-8均明顯高于緩解

2、期及健康人;用IL-17刺激體外培養(yǎng)的人支氣管上皮細胞可以引起IL-8的產(chǎn)生,誘導中性粒細胞在氣道中的聚集,從而使哮喘病情加重甚至惡化;哮喘患者外周血中CD4~+T細胞IL-8表達水平明顯高于正常人;CD4~+T細胞亞群中IL-17是Th17細胞特異分泌的,因此,我們假設IL-17促進CD4~+T細胞分泌IL-8,可能是Th17細胞參與哮喘發(fā)病機制之一。
　　方法：收集健康人,哮喘急性發(fā)作期輕、中度病人各4例,三組患者性別、年齡比

3、較無顯著性差異,具有可比性。各取外周血60ml,免疫磁珠分離、純化外周血CD4~+T細胞,流式細胞儀檢測細胞純度,臺盼藍拒染色法測細胞活力,然后哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4~+T細胞分成四組進行培養(yǎng),分別加入重組hIL-17(A組),重組hIL-17+anti-hIL-17Ab(B組),hIL-17+hIgG(C組)及原液培養(yǎng)(D組);健康對照組進行原液培養(yǎng)(E組)。培養(yǎng)36h時,用ELISA法測定培養(yǎng)上清液中IL-8的濃度。

4、　　結果：1.哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4~+T細胞原液培養(yǎng)上清液的IL-8濃度(D組)高于健康原液組(E組)(均P<0.05),哮喘急性發(fā)作期中度患者外周血CD4~+T淋巴細胞培養(yǎng)上清液的IL-8濃度較哮喘急性發(fā)作輕度患者組明顯增加,且與病情嚴重程度呈正相關(r=0.764,P=0.02α=0.05);2.哮喘急性發(fā)作期患者的外周血CD4~+T細胞培養(yǎng)后上清液中的IL-8濃度變化為:A組、C組>D組>B組,差異有統(tǒng)計學意義。(均P<