特應(yīng)性皮炎患者外周血RORγtmRNA、IL-17、IL-23水平變化及意義.pdf

1、背景：
　　特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis/AD)是以慢性瘙癢性炎癥性，反復(fù)發(fā)作為特征的皮膚疾病。患者有產(chǎn)生IgE升高傾向，臨床表現(xiàn)以皮膚瘙癢、干燥、脫屑、炎癥性斑疹為主，也可出現(xiàn)破潰、滲出等急性期表現(xiàn)。嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。AD患者易伴發(fā)哮喘、過(guò)敏性鼻炎，或者家族遺傳過(guò)敏病史等特應(yīng)性疾病病史。發(fā)病以兒童及青少年為多，皮損具有一定時(shí)效性特點(diǎn)，在不同年齡階段，皮損表現(xiàn)及分布具有不同的特點(diǎn)。AD發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清

2、楚。遺傳背景、皮膚屏障功能受損、免疫系統(tǒng)平衡的異常偏移及微生物的超抗原等被認(rèn)為與AD及特應(yīng)性疾病之間有密切聯(lián)系。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)把AD的發(fā)病機(jī)制主要?dú)w結(jié)于原發(fā)的免疫反應(yīng)異常，表現(xiàn)為Th1/Th2功能的失調(diào)，高水平IgE的產(chǎn)生，肥大細(xì)胞的過(guò)度活化，以及皮膚內(nèi)樹(shù)枝狀細(xì)胞的異常信號(hào)介導(dǎo)等。Th1/Th2分化失衡引起細(xì)胞因子分泌異常在AD的不同時(shí)期、不同程度的皮損內(nèi)表達(dá)水平有差別。急性期以Th2反應(yīng)為主，IL-4、IL-13呈顯著升高;而慢性期則以T

3、h1反應(yīng)明顯增強(qiáng)，IFN-γ呈顯著升高。Th17細(xì)胞是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的CD4+T細(xì)胞亞型，主要產(chǎn)生IL-17。它在防御胞外細(xì)菌感染、介導(dǎo)慢性炎癥以及自身免疫病中發(fā)揮重要作用。IL-17的主要生物學(xué)功能是促進(jìn)炎性反應(yīng)。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為Th17細(xì)胞和特應(yīng)性皮炎發(fā)病機(jī)制有密切相關(guān)性。RORγt作為Th17細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)Th17細(xì)胞分化起關(guān)鍵作用，并維持Th17細(xì)胞的分泌功能。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們生活水平的提高，環(huán)境因素變化等影

4、響特應(yīng)性皮炎的患病率，且在全球范圍呈逐年上升趨勢(shì)，尤其工業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家。目前我國(guó)AD城市患病率為1.10％，農(nóng)村為0.73％，城市明顯高于農(nóng)村。嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，比如患者因?yàn)轲W會(huì)嚴(yán)重影響睡眠質(zhì)量，甚至影響患者的各方面的發(fā)育情況，AD這個(gè)疾病可能會(huì)一直延續(xù)到患者成年時(shí)期，給患者及家屬帶來(lái)了沉重的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。所以探索本病的發(fā)病機(jī)制，尋求更有效的治療措施，改善患者預(yù)后是目前皮膚科臨床醫(yī)生面臨的巨大挑戰(zhàn)。
　　目的：
　　從

5、Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子對(duì)AD的免疫反應(yīng)影響的角度探討AD發(fā)病的機(jī)制;研究Th17細(xì)胞、IL-17及IL-23在特應(yīng)性皮炎疾病中的表達(dá)水平及意義，增強(qiáng)對(duì)AD的免疫學(xué)異常的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步揭示AD的發(fā)病機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　選擇2012年1月-2013年12月在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院皮膚科確診為特應(yīng)性皮炎的患者52例。均符合Williams診斷標(biāo)準(zhǔn)。男29例，女23例，平均年齡2.46±0.97歲，其中2例伴有過(guò)敏性鼻炎病

6、史;4例伴有過(guò)敏性哮喘病史;8例伴有家族過(guò)敏性疾病史;10例同時(shí)伴有個(gè)人及家族過(guò)敏性疾病史。所有患者于入組前1周停用抗組胺藥、外用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及免疫調(diào)節(jié)劑，6個(gè)月內(nèi)未系統(tǒng)使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及免疫調(diào)節(jié)劑。正常對(duì)照組為本院兒外科患者（除外伴有感染及肝腎功能異?；颊撸?2例。采集AD組及正常對(duì)照組清晨空腹外周血，離心取血清置于-80℃冰箱冷凍備用。采取ELISA法檢測(cè)患者組及正常對(duì)照組血清IL-17、IL-23濃度，采取re

7、al time PCR法檢測(cè)外周血Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt mRNA的表達(dá)水平。比較AD組52例與正常對(duì)照組32例IL-17、IL-23表達(dá)水平;由于AD組22例和正常對(duì)照組2例中血液樣本較少，提取的總RNA量及濃度不夠，所以比較了AD組30例與正常對(duì)照組30例外周血Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt mRNA的表達(dá)水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　一、AD組與正常對(duì)照組的外周血Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt

8、mRNA的表達(dá)情況比較
　　AD組與正常對(duì)照組比較患者組外周血Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt mRNA表達(dá)，采用2-△△Ct方法比較，AD組是正常對(duì)照組的1.85倍。
　　二、AD組與正常對(duì)照組的血清IL-17、IL-23濃度表達(dá)情況比較
　　1、AD組與正常對(duì)照組比較，AD組血清IL-17濃度顯著升高(Z=-3.082)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002＜0.05);
　　2、AD組與正常對(duì)照組比較，A