食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留檢測(cè)技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)化研究.pdf

1、民以食為天，食以安為先。食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)對(duì)于保障人的健康至關(guān)重要。本論文針對(duì)當(dāng)前食品鏈中濫用激素和抗生素導(dǎo)致大量藥物殘留引發(fā)食品安全風(fēng)險(xiǎn)的現(xiàn)實(shí)問題，綜述了食品鏈中激素與抗生素的危害和來源、藥物殘留的狀況、現(xiàn)存風(fēng)險(xiǎn)因素、檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀。本論文旨在建立和發(fā)展高靈敏、高通量、高選擇性檢測(cè)食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留的有效的新方法和方法的標(biāo)準(zhǔn)化。基于現(xiàn)代分離分析技術(shù)(HPLC, GC-MS and RRLC-MS/MS)，重點(diǎn)研究了牛乳中活性β

2、-內(nèi)酰胺酶類抗生素拮抗劑的檢測(cè)技術(shù)和方法標(biāo)準(zhǔn)化、飼料中4種β-內(nèi)酰胺類抗生素的檢測(cè)技術(shù)和方法標(biāo)準(zhǔn)化、豬肉中21種磺胺類藥物與代謝物的檢測(cè)技術(shù)、嬰幼兒配方奶粉中6種雌激素殘留的質(zhì)譜解析、食品包裝材料中雙酚 A環(huán)境激素遷移量的檢測(cè)技術(shù)等。本論文所提出的這些方法，其分析特性符合方法學(xué)的要求。其中，β-內(nèi)酰胺酶類抗生素拮抗劑的檢測(cè)和4種β-內(nèi)酰胺類抗生素的檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)已成為河北省地方標(biāo)準(zhǔn)。
　　本論文提出了原乳中活性β-內(nèi)酰胺酶拮抗劑的快速

3、高分離液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（RRLC-MS/MS）的定性檢測(cè)新方法。利用活性β-內(nèi)酰胺酶能夠酶解青霉素族藥物的原理，在原乳中加入一定量氨芐青霉素，酶解1h后，檢測(cè)原乳中氨芐青霉素酶解率，定性活性目標(biāo)物的存在。試樣中氨芐青霉素經(jīng)乙腈溶液提取，HLB固相萃取柱凈化和濃縮后，RRLC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式定性、定量分析。該方法對(duì)活性β-內(nèi)酰胺酶檢出限為4U/mL，對(duì)原乳中添加1mg/kg水平氨芐青霉素的加標(biāo)回收率在92.3％～95.5％之間

4、，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 RSD（n=6）5.4％～8.1％之間,并按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)起草程序?qū)崿F(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化，形成河北省地方標(biāo)準(zhǔn)（DB13/T1080-2009）。
　　本論文發(fā)展了青霉素G、青霉素V、氨芐西林、阿莫西林4種β-內(nèi)酰胺類藥物的快速高分離液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（RRLC-MS/MS）測(cè)定方法。試樣加入去離子水高速離心，上清液經(jīng)HLB固相萃取柱凈化，以甲醇洗脫，洗脫液氮吹吹干，乙腈定容待測(cè)。本方法線性在0-16mg/L之間，線性相關(guān)系數(shù)R均大

5、于0.9999，青霉素G和青霉素V的檢出限為1.0ug/kg，氨芐西林和阿莫西林的檢出限為2.0ug/kg，加標(biāo)回收率試驗(yàn)添加了0.2mg/kg、4.0mg/kg、7.5mg/kg的3個(gè)濃度水平，其中青霉素G平均回收率在97.4～101.2％之間，RSD在2.09～2.67％之間；青霉素 V平均回收率在95.0～100.9％之間，RSD在1.70～3.92％之間；氨芐西林平均回收率在96.1～99.7％之間，RSD在1.98～3.73％

6、之間；阿莫西林平均回收率在93.3～98.8％之間，RSD在3.19～6.04％之間,并按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)起草程序?qū)崿F(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化，形成河北省地方標(biāo)準(zhǔn)（DB13/T1384.1-2011）。
　　本論文建立了豬肉中17種磺胺類藥物(磺胺甲氧噠嗪、磺胺甲噻唑、磺胺二甲異惡唑、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺甲基異惡唑、磺胺苯吡唑、磺胺甲基嘧啶、甲氧芐氨嘧啶、磺胺醋酰、磺胺二甲嘧啶、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺喹惡啉、磺胺吡啶、磺胺二甲氧噠嗪、

7、磺胺多辛、磺胺嘧啶)及4種N-乙酰化代謝產(chǎn)物(N-乙?；前范奏奏?、N-乙?；前芳讗哼?、N-乙酰磺胺甲嘧啶、N-乙?；前粪奏?的超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)方法。樣品通過乙酸乙酯超聲提取，固相萃取柱凈化，氮吹濃縮后，超快速液相色譜分離，串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。本方法在1μg/kg～200μg/kg范圍內(nèi)各化合物線性良好，線性相關(guān)系數(shù) r均大于0.998，檢出限為0.1μg/kg～0.5μg/kg，方法在3個(gè)水平的添加回收率在68.3％～104.

8、4％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.93％～9.25％之間。
　　本論文在前期建立嬰幼兒奶粉中6種雌激素檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上，對(duì)已烯雌酚、17α-乙炔基雌二醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇和雌酮的六種雌激素殘留的氣相色譜-質(zhì)譜機(jī)理進(jìn)行深入解析。研究?jī)?nèi)容主要包括兩方面：其一為雌激素總離子流圖的分析，通過優(yōu)化色譜條件，實(shí)現(xiàn)6種待測(cè)物特征峰得到很好的分開，特別是雌二醇的兩種同分異構(gòu)體得到較好分離，從空白基質(zhì)加標(biāo)圖看出目標(biāo)峰與干擾峰分離較好

9、；其二為質(zhì)譜裂解的解析，分析了6種目標(biāo)物的正離子和負(fù)離子模式的電子轟擊原理，發(fā)現(xiàn)了己烯雌酚與其他5種物質(zhì)裂解機(jī)理的不同。
　　本論文建立采用高效液相色譜法對(duì)塑料食品包裝材料中雙酚A向食品模擬物遷移量的檢測(cè)方法。實(shí)驗(yàn)使用4種食品模擬物：水、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4％乙酸溶液、體積分?jǐn)?shù)30％的乙醇溶液和脂肪類模擬物(正己烷、異辛烷和橄欖油)。結(jié)果表明，雙酚 A在與食品塑料包裝接觸過程中，無論在何種情況下都會(huì)向食品模擬物中遷移，尤其向醇類模擬物中遷

10、移最嚴(yán)重；在溫度超過60℃時(shí)，雙酚 A向食品模擬物中的遷移率驟增；在微波加熱的情況下，尤其是大功率下雙酚 A向食品模擬物中的遷移速率最快。該方法檢測(cè)限為0.3ng/mL，線性范圍為0.5～100ng/mL，線性相關(guān)系數(shù)為0.9997，回收率在92.0％～102.4％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤2.84(n=5)。
　　上述建立的檢測(cè)方法同時(shí)具體靈敏、快速、高通量、準(zhǔn)確可靠的特點(diǎn)，適用于食品鏈中激素與抗生素類藥物殘留的定性、定量及確證檢測(cè)，