水中多種抗生素殘留同時(shí)檢測(cè)新技術(shù)的研究.pdf

1、自抗生素被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，越來(lái)越多的抗生素被用于臨床和畜牧業(yè)養(yǎng)殖，由于濫用問(wèn)題造成的抗生素污染已經(jīng)越來(lái)越多的引起人們的關(guān)注。因此必須建立一種快速高效、高靈敏度、高選擇性的檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)環(huán)境中的抗生素。本論文針對(duì)生產(chǎn)量和使用量均排在前列的11種抗生素，采用乙腈-磷酸氫二鉀雙水相體系進(jìn)行分離、富集后，用超高壓液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀同時(shí)檢測(cè)，建立了環(huán)境水中多種抗生素的同時(shí)分析方法，并運(yùn)用此方法檢測(cè)了山東省內(nèi)三個(gè)地區(qū)的環(huán)境水，實(shí)際應(yīng)用效果良好。
　

2、　第一章對(duì)環(huán)境水中抗生素類(lèi)藥物的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，包括抗生素污染對(duì)人類(lèi)健康帶來(lái)的危害以及環(huán)境水抗生素殘留的前處理方法和分析方法。對(duì)雙水相萃取和超高壓液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀在抗生素分析檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行了概述。闡述了水中多種抗生素殘留同時(shí)檢測(cè)方法研究的現(xiàn)實(shí)意義。
　　第二章建立11種抗生素的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)方法。在電噴霧離子源、正離子掃描（ESI+）、多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）的模式下，通過(guò)優(yōu)化各個(gè)質(zhì)譜參數(shù)（碰撞氣：4；氣簾氣：25；霧

3、化氣：45；輔助氣：50；離子源溫度：450.0℃；離子化電壓：5000.0 V；總運(yùn)行時(shí)間：14.015 min；延遲時(shí)間：0.1 sec，以及各個(gè)抗生素的去簇電壓、錐孔電壓、碰撞電壓）和液相色譜參數(shù)（流動(dòng)相組成（甲醇、水）、色譜柱（250 mm、C18柱）及柱溫的選擇（20℃）和梯度洗脫程序等），建立了高效快速準(zhǔn)確的儀器分析方法。11種抗生素在線(xiàn)性范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系，青霉素的線(xiàn)性范圍為0.5-200μg/L，其他10種抗生素的

4、線(xiàn)性范圍均為0.2-200μg/L，相關(guān)系數(shù)均在0.9965-0.9996之間。儀器檢出限青霉素和頭孢呋辛是0.1μg/L，其他9種抗生素均低于0.02μg/L。儀器精密度良好，RSD均小于6.2％。本研究所建立的11種抗生素同時(shí)檢測(cè)方法具有高選擇性、高靈敏度的優(yōu)點(diǎn)，并檢測(cè)效率高，檢測(cè)時(shí)間在14 min以?xún)?nèi)。
　　第三章雙水相體系的選擇與成相行為的研究。本章以萃取率作為衡量標(biāo)準(zhǔn)，選定了同時(shí)萃取11種抗生素的雙水相體系為乙腈-磷酸氫

5、二鉀雙水相體系。測(cè)定了本雙水相體系的雙節(jié)點(diǎn)數(shù)據(jù)和液液相平衡數(shù)據(jù)，繪制出完整的三角相圖，確定了雙水相體系的成相范圍。通過(guò)篩選得到了適用于本雙水相體系的擬合方程，即ω1=a1?exp(?ω2?b1)+a2?exp(?ω2?b2)+c，R2=0.9981，標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.23，驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)所得液液相平衡數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
　　第四章水中11種抗生素殘留同時(shí)檢測(cè)方法的建立。在確定了乙腈-磷酸氫二鉀雙水相體系相圖的基礎(chǔ)上，研究了11種抗生素在雙水相

6、體系中的萃取行為，并考察了影響抗生素在體系中萃取率和分配系數(shù)的因素，從而得出最佳萃取條件。實(shí)驗(yàn)所得最佳的乙腈-磷酸氫二鉀雙水相體系的萃取條件為磷酸氫二鉀、乙腈和水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為25%、40%和35%，離心時(shí)間為6 min，溫度為常溫（25℃）。在最佳條件下，11種抗生素的萃取效率在68.41-99.08%之間，分配系數(shù)在0.79-2.49之間。首次建立起了同時(shí)檢測(cè)11種抗生素的分析方法。以乙腈-磷酸氫二鉀雙水相萃取為前處理方法，集萃取

7、、凈化、濃縮一步完成，UPLC-MS/MS為檢測(cè)手段，選擇性強(qiáng)、靈敏度高。實(shí)驗(yàn)所用工作曲線(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，方法檢出限（MDL）均不超過(guò)1.1 ng/L。以棗莊市山亭區(qū)的某地井水作為基底，加標(biāo)回收率在80-120%之間，方法精密度均小于8%，完全可以滿(mǎn)足水體中痕量級(jí)抗生素的檢測(cè)要求。應(yīng)用此檢測(cè)方法檢測(cè)山東省內(nèi)三個(gè)地區(qū)的環(huán)境水樣（棗莊、煙臺(tái)、濰坊），應(yīng)用性良好。實(shí)驗(yàn)證明，在山東省內(nèi)三個(gè)地區(qū)均有不同種類(lèi)和濃度的抗生素類(lèi)藥