歸芪聰志湯干預血管性癡呆模型大鼠及腦組織氧化損傷、內(nèi)質網(wǎng)應激的研究.pdf

1、目的：通過觀察歸芪聰志湯對血管性癡呆（VD）模型大鼠學習記憶能力、海馬組織病理、腦皮質氧化損傷相關酶以及海馬內(nèi)質網(wǎng)應激標志性分子的影響，探討該方治療血管性癡呆的藥效及其作用機理。
　　方法：雄性wistar大鼠80只（體重280±10g），按隨機數(shù)字表選10只大鼠作為假手術組，其余大鼠采用反復夾閉頸總動脈加注射硝普鈉降壓聯(lián)合永久結扎單側頸總動脈法制備VD模型；按隨機數(shù)字表分為模型組、陽性對照組（腦復康）、歸芪聰志湯高、中、低組。藥

2、物干預治療28天后進行Morris水迷宮行為學檢測，通過定位航行及空間搜索實驗檢測大鼠學習記憶能力；處死大鼠，取各組大鼠腦皮質及海馬組織進行指標檢測， HE染色觀察各組大鼠海馬組織病理改變；生物化學法檢測各組大鼠腦皮質勻漿液氧化損傷相關酶SOD、GSH-Px、MDA含量；RT-qPCR和Western blot分別檢測各組大鼠之間內(nèi)質網(wǎng)應激相關分子HSP70、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1mRNA和蛋白的表達量變

3、化。
　?。?）Morris水迷宮行為學檢測：與假手術組相比，模型組大鼠逃逸潛伏期明顯增長，穿越平臺次數(shù)明顯減少（P﹤0.05）；與模型組相比，各藥物干預組大鼠逃逸潛伏期顯著縮短，穿越平臺次數(shù)顯著增加（P﹤0.05）；其中歸芪聰志湯中劑量組明顯優(yōu)于陽性對照組（P﹤0.05）。
　?。?）海馬組織病理觀察：與假手術組相比，模型組海馬組織神經(jīng)細胞損傷加重；與模型組相比，各藥物干預組海馬神經(jīng)細胞損傷程度均減輕；與陽性對照組相比，其

4、中歸芪聰志湯中、高劑量組海馬組織神經(jīng)細胞損傷程度明顯輕于陽性對照組。
　?。?）氧化損傷相關酶檢測：與假手術組相比，模型組大鼠SOD和 GSH-Px明顯降低，MDA明顯升高（P﹤0.05）；與模型組相比，各藥物干預組 SOD和 GSH-Px顯著升高，MDA顯著降低（P﹤0.05）；其中歸芪聰志湯中劑量組明顯優(yōu)于陽性對照組（P﹤0.05）。
　?。?）內(nèi)質網(wǎng)應激相關分子 mRNA檢測：與假手術組相比，模型組大鼠海馬組織HSP7

5、0、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1基因表達顯著上調（P＜0.05）；與模型組相比，除歸芪聰志湯低劑量組，各藥物干預組HSP70、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1基因表達顯著下調（P＜0.05)；與陽性對照組相比，HSP27中劑量組顯著下調（P＜0.05)，歸芪聰志湯各劑量組的其它五個基因無顯著變化。
　?。?）內(nèi)質網(wǎng)應激相關分子蛋白檢測：與假手術組相比，模型組大鼠海馬組織GRP78、G

6、RP94、CHOP、XBP1蛋白表達顯著上調（P＜0.05）；與模型組相比，除歸芪聰志湯低劑量組，各藥物干預組四個蛋白表達顯著下調（P＜0.05）；與陽性對照組相比，歸芪聰志湯中劑量組四個蛋白顯著下調（P＜0.05）。
　　結論：反復夾閉頸總動脈加注射硝普鈉降壓聯(lián)合永久性結扎單側頸總動脈法可以較好的復制VD大鼠模型，模型可靠。歸芪聰志湯能夠顯著改善VD模型大鼠的學習記憶能力，減輕海馬神經(jīng)細胞損傷，且以中劑量效果最為顯著。其機理與降