蛭龍活血通瘀膠囊對血管性癡呆大鼠的干預(yù).pdf

1、目的：觀察蛭龍活血通瘀膠囊對血管性癡呆（VD）大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)和學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用，并初步探討其作用機(jī)制。方法；Morris水迷宮篩選學(xué)習(xí)記憶正常雄性SD大鼠70只，隨機(jī)分為假手術(shù)組10只和手術(shù)組：模型組、2g/kg吡拉西坦組、1.6g/kg與0.4g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組。永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）復(fù)制血管性癡呆模型；灌胃給藥，1次/日，連續(xù)8周。Morris水迷宮檢測各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。4％多聚甲醛灌注固定，腦組織

2、石蠟包埋，連續(xù)冠狀切片。HE染色和免疫組織化學(xué)染色（SP法），光鏡觀察海馬CA1區(qū)的組織學(xué)改變及TNF-α、IL-1β和NF-κB的陽性表達(dá)。Image proplus6.0軟件測定TNF-α、IL-1β和NF-κB的平均光密度。下腔靜脈取血，冰箱靜置過夜，2000轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)速離心5min制備血清，-70℃保存?；瘜W(xué)比色法測定血清中AChE和iNOS的活性及NO含量；ELISA法測定血清TNF-α與IL-1β的含量。結(jié)果：（1）定位航行實(shí)

3、驗(yàn)：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠逃避潛伏期明顯增長（P<0.05）；與模型組比較，2g/kg吡拉西坦組、1.6g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組可明顯縮短大鼠逃避潛伏期（P<0.05）?？臻g探索實(shí)驗(yàn)：模型組大鼠平臺象限停留時(shí)間明顯縮短，跨越虛擬平臺的頻率明顯減低（P<0.05）；與模型組比較，2g/kg吡拉西坦組、1.6g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組可明顯延長大鼠平臺象限停留時(shí)間，明顯增加跨域虛擬平臺的頻率（P<0.05）。（2）與假手術(shù)組比較，模型

4、組大鼠TNF-α、IL-1β和NO含量明顯升高；AChE和iNOS活性明顯增強(qiáng)；海馬CA1區(qū)IL-1β、TNF-α和NF-κB的陽性表達(dá)明顯增多（P<0.05）。2g/kg吡拉西坦組、1.6g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組可明顯降低血清TNF-α、IL-1β和NO含量；明顯減弱AChE和iNOS活性；明顯減少海馬CA1區(qū)IL-1β、TNF-α和NF-κB的陽性表達(dá)（P<0.05）。0.4g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組對上述改善不明顯（P<0.05

5、）。（3）光鏡下，假手術(shù)組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞3～4層，排列緊密、整齊；細(xì)胞形態(tài)正常，胞體完整，界線清晰，無或較少變性壞死；胞核大而圓，胞質(zhì)豐富。VD模型組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞丟失明顯，細(xì)胞1～2層，排列紊亂、松散；錐體細(xì)胞固縮，界線不清，可見大量變性壞死細(xì)胞；核固縮、核碎裂，深藍(lán)色；胞漿濃縮，深紅色，鬼影細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞被吞噬現(xiàn)象。2g/kg吡拉西坦組、1.6g/kg蛭龍活血通瘀膠囊組可明顯改善上述神經(jīng)元損傷。結(jié)論：1.結(jié)扎雙側(cè)

6、CCA，可成功制備與炎性損傷相關(guān)的大鼠VD模型。2.蛭龍活血通瘀膠囊可明顯改善VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力；3.蛭龍活血通瘀膠囊改善VD大鼠學(xué)習(xí)記憶的機(jī)制與以下因素有關(guān)：①抑制前炎癥因子TNF-α和IL-1β的產(chǎn)生，直接對抗這些炎性因子對VD大鼠海馬神經(jīng)元的損傷；②抑制由TNF-α和IL-1β繼發(fā)的炎性因子NF-κB、NO和iNOS所致海馬神經(jīng)元的損傷；③抑制TNF-α、IL-1β、NF-κB、NO和iNOS相互促進(jìn)作用形成的炎癥級聯(lián)反應(yīng)對海