DVC-PVN Nesfatin-1通路對胃牽張敏感神經元放電活動和胃運動調控研究.pdf

1、目的：
　　Nesfatin-1作為一種抑制攝食的神經肽，具有調控胃腸運動的作用，但是nesfatin-1對胃運動調控機制還未明確。本實驗擬通過觀察nesfatin-1對大鼠下丘腦室旁核（PVN）胃牽張敏感神經元（GD）放電活動的影響，以及迷走神經復合體（DVC）對其調控作用，闡述DVC和PVN間nesfatin-1神經通路的構成，觀察PVN nesfatin-1對胃收縮幅度及頻率的影響及潛在機制。
　　方法：
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2、采用熒光金逆行追蹤技術，觀察DVC-PVN間神經通路；②結合熒光免疫組化染色，觀察DVC-PVN nesfatin-1神經通路構成；③采用細胞外放電就記錄，觀察nesfatin-1對GD放電活動的影響；④過在體胃運動研究，觀察nesfatin-1對清醒自由活動大鼠胃收縮幅度和頻率的影響；⑤觀察nesfatin-1對迷走神經切斷術后大鼠胃收縮幅度和頻率的影響。
　　結果：
　?、倌嫘凶粉櫧Y合免疫熒光染色研究發(fā)現，PVN內有NU

3、CB2/nesfatin-1/熒光金（FG）雙標神經元；②PVN內共記錄到187個放電神經元，其中126個為GD敏感神經元，包括71個GD-E神經元和55個GD-I神經元。PVN微量注射nesfatin-1后，GD-E神經元放電頻率明顯增強（P＜0.01），而GD-I神經元放電頻率明顯減弱（P＜0.01）；③大鼠PVN內預先微量注射SHU9119，nesfatin-1對GD-E神經元放電的興奮效應可被部分阻斷（P＜0.05），對GD-I

4、神經元放電的抑制效應也被部分阻斷（P＜0.05）。電刺激DVC，在PVN記錄到的71個GD-E神經元中有24個被興奮，14個被抑制，33個無反應。55個GD-I神經元，16個被興奮，13個被抑制，26個無反應。電刺激DVC，GD-E神經元放電頻率增加（P＜0.05），但預先PVN內注射抗NUCB2/nesfatin-1抗體，再電刺激DVC，GD-E神經元放電頻率較前明顯下降（P＜0.01）。電刺激DVC，GD-I神經元放電頻率也顯著增加

5、（P＜0.05），預先PVN內注射抗NUCB2/nesfatin-1抗體，再電刺激DVC，GD-I神經元放電頻率顯著增強（P＜0.01）。④體胃運動結果表明，PVN微量注射nesfatin-1，大鼠胃收縮幅度以及收縮頻率明顯下降，且呈明顯劑量依賴關系。SHU9119可部分阻斷nesfatin-1對胃運動的抑制（P＜0.05）。⑤迷走神經切斷術可部分阻斷nesfatin-1對大鼠胃運動抑制效應。
　　結論：
　　nesfafi