DVC-PVN Nesfatin-1通路對胃牽張敏感神經(jīng)元放電活動和胃運(yùn)動調(diào)控研究.pdf

1、目的：
　　Nesfatin-1作為一種抑制攝食的神經(jīng)肽，具有調(diào)控胃腸運(yùn)動的作用，但是nesfatin-1對胃運(yùn)動調(diào)控機(jī)制還未明確。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察nesfatin-1對大鼠下丘腦室旁核（PVN）胃牽張敏感神經(jīng)元（GD）放電活動的影響，以及迷走神經(jīng)復(fù)合體（DVC）對其調(diào)控作用，闡述DVC和PVN間nesfatin-1神經(jīng)通路的構(gòu)成，觀察PVN nesfatin-1對胃收縮幅度及頻率的影響及潛在機(jī)制。
　　方法：
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2、采用熒光金逆行追蹤技術(shù)，觀察DVC-PVN間神經(jīng)通路；②結(jié)合熒光免疫組化染色，觀察DVC-PVN nesfatin-1神經(jīng)通路構(gòu)成；③采用細(xì)胞外放電就記錄，觀察nesfatin-1對GD放電活動的影響；④過在體胃運(yùn)動研究，觀察nesfatin-1對清醒自由活動大鼠胃收縮幅度和頻率的影響；⑤觀察nesfatin-1對迷走神經(jīng)切斷術(shù)后大鼠胃收縮幅度和頻率的影響。
　　結(jié)果：
　　①逆行追蹤結(jié)合免疫熒光染色研究發(fā)現(xiàn)，PVN內(nèi)有NU

3、CB2/nesfatin-1/熒光金（FG）雙標(biāo)神經(jīng)元；②PVN內(nèi)共記錄到187個放電神經(jīng)元，其中126個為GD敏感神經(jīng)元，包括71個GD-E神經(jīng)元和55個GD-I神經(jīng)元。PVN微量注射nesfatin-1后，GD-E神經(jīng)元放電頻率明顯增強(qiáng)（P＜0.01），而GD-I神經(jīng)元放電頻率明顯減弱（P＜0.01）；③大鼠PVN內(nèi)預(yù)先微量注射SHU9119，nesfatin-1對GD-E神經(jīng)元放電的興奮效應(yīng)可被部分阻斷（P＜0.05），對GD-I

4、神經(jīng)元放電的抑制效應(yīng)也被部分阻斷（P＜0.05）。電刺激DVC，在PVN記錄到的71個GD-E神經(jīng)元中有24個被興奮，14個被抑制，33個無反應(yīng)。55個GD-I神經(jīng)元，16個被興奮，13個被抑制，26個無反應(yīng)。電刺激DVC，GD-E神經(jīng)元放電頻率增加（P＜0.05），但預(yù)先PVN內(nèi)注射抗NUCB2/nesfatin-1抗體，再電刺激DVC，GD-E神經(jīng)元放電頻率較前明顯下降（P＜0.01）。電刺激DVC，GD-I神經(jīng)元放電頻率也顯著增加

5、（P＜0.05），預(yù)先PVN內(nèi)注射抗NUCB2/nesfatin-1抗體，再電刺激DVC，GD-I神經(jīng)元放電頻率顯著增強(qiáng)（P＜0.01）。④體胃運(yùn)動結(jié)果表明，PVN微量注射nesfatin-1，大鼠胃收縮幅度以及收縮頻率明顯下降，且呈明顯劑量依賴關(guān)系。SHU9119可部分阻斷nesfatin-1對胃運(yùn)動的抑制（P＜0.05）。⑤迷走神經(jīng)切斷術(shù)可部分阻斷nesfatin-1對大鼠胃運(yùn)動抑制效應(yīng)。
　　結(jié)論：
　　nesfafi