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文檔簡介
1、目的:觀察抑瘤素M在哮喘大鼠氣道壁中的表達,探討抑瘤素M的表達與哮喘氣道重塑的關系,為哮喘的防治尋找可能的靶點。
方法:選用30只Wistar雄性健康大鼠,鼠齡8W,體重200~220g。將30只Wistar大鼠隨機分為二組:對照組和哮喘組。第一天哮喘組用用抗原混懸液2ml(含卵白蛋白100mg,氫氧化鋁200mg、滅活百日咳桿菌菌苗6×109個)腹腔注射致敏。第15天開始1%卵白蛋白溶液霧化激發(fā),每天一次,每次20—30
2、分鐘,共8W,建立哮喘模型。對照組第一天用第1天用生理鹽水2ml腹腔注射,第15天開始用生理鹽水霧化吸入,余同哮喘組。末次激發(fā)結24小時后,取各只大鼠的支氣管肺泡灌洗液行嗜酸性粒細胞、巨噬細胞、中性粒細胞,淋巴細胞的分類計數(shù)。采取肺組織標本,采用HE染色觀察氣道形態(tài)學改變;采用免疫組化染色并經(jīng)計算機圖像分析測定氣道壁中Oncostatin M蛋白表達水平;同時采用RT-PCR法測定肺組織中OncostatinMmRNA的表達。
3、 結果:(1)哮喘組大鼠支氣管肺泡灌洗液嗜酸性粒細胞浸潤數(shù)為(9.21±1.24)與正常對照組比較(0.71±0..01),明顯增加,差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。而哮喘組大鼠支氣管肺泡灌洗液巨噬細胞、中性粒細胞,淋巴細胞浸潤數(shù)分別為(64.81±2.52)(11.52±2.02)(13.24±2,36)],與正常對照組[(80.19±2.02)(9.14±2.57)(10.54±1.50)]比較,差異具無統(tǒng)計學意義(P均
4、>0.05)。病理證實哮喘模型基本成功。(2)哮喘組大鼠總管壁厚度(WAt/Pbm),氣管內(nèi)壁厚度(WAi/Pbm)及平滑肌層厚度(WAm/Pbm)分別為[(132.06±6.13)(81.52±1.55)(43.71±5.67)],與正常對照組[(79.84±2.40)(61.12±3.81)(16.78±2.13)]比較,顯著增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05。(3)哮喘組肺組織中抑瘤素mRNA表達為(0.95±0.04),高于
5、正常對照組的(0.45±0.16),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(4)抑瘤素M免疫組化染色陽性細胞表達強度,哮喘組(0.34±0.13)明顯強于對正常對照組大鼠(0.15±0.05),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(5)氣管壁抑瘤素M水平與哮喘組大鼠總管壁厚度,氣管內(nèi)壁厚度,平滑肌層厚度呈正相關(R值分別為0.768、0.532、0.745,P均<0.05),對照組無相關性(R值分別為-0.135、-0.308、-0.32
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