抑瘤素M與哮喘大鼠氣道重塑的關(guān)系研究.pdf

1、目的:觀察抑瘤素M在哮喘大鼠氣道壁中的表達(dá)，探討抑瘤素M的表達(dá)與哮喘氣道重塑的關(guān)系，為哮喘的防治尋找可能的靶點(diǎn)。
　　 方法:選用30只Wistar雄性健康大鼠，鼠齡8W，體重200～220g。將30只Wistar大鼠隨機(jī)分為二組:對(duì)照組和哮喘組。第一天哮喘組用用抗原混懸液2ml（含卵白蛋白100mg，氫氧化鋁200mg、滅活百日咳桿菌菌苗6×109個(gè)）腹腔注射致敏。第15天開(kāi)始1％卵白蛋白溶液霧化激發(fā)，每天一次，每次20—30

2、分鐘，共8W，建立哮喘模型。對(duì)照組第一天用第1天用生理鹽水2ml腹腔注射，第15天開(kāi)始用生理鹽水霧化吸入，余同哮喘組。末次激發(fā)結(jié)24小時(shí)后，取各只大鼠的支氣管肺泡灌洗液行嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞的分類(lèi)計(jì)數(shù)。采取肺組織標(biāo)本，采用HE染色觀察氣道形態(tài)學(xué)改變;采用免疫組化染色并經(jīng)計(jì)算機(jī)圖像分析測(cè)定氣道壁中Oncostatin M蛋白表達(dá)水平;同時(shí)采用RT-PCR法測(cè)定肺組織中OncostatinMmRNA的表達(dá)。
　

3、　 結(jié)果:(1)哮喘組大鼠支氣管肺泡灌洗液嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)為(9.21±1.24)與正常對(duì)照組比較(0.71±0..01)，明顯增加，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01）。而哮喘組大鼠支氣管肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)分別為(64.81±2.52)(11.52±2.02)(13.24±2，36)]，與正常對(duì)照組[(80.19±2.02)（9.14±2.57）(10.54±1.50)]比較，差異具無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均

4、＞0.05）。病理證實(shí)哮喘模型基本成功。(2)哮喘組大鼠總管壁厚度(WAt/Pbm)，氣管內(nèi)壁厚度(WAi/Pbm)及平滑肌層厚度(WAm/Pbm)分別為[(132.06±6.13)(81.52±1.55)(43.71±5.67)]，與正常對(duì)照組[(79.84±2.40)(61.12±3.81)(16.78±2.13)]比較，顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05。(3)哮喘組肺組織中抑瘤素mRNA表達(dá)為(0.95±0.04)，高于

5、正常對(duì)照組的(0.45±0.16)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。(4)抑瘤素M免疫組化染色陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)度，哮喘組(0.34±0.13)明顯強(qiáng)于對(duì)正常對(duì)照組大鼠(0.15±0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。(5)氣管壁抑瘤素M水平與哮喘組大鼠總管壁厚度，氣管內(nèi)壁厚度，平滑肌層厚度呈正相關(guān)（R值分別為0.768、0.532、0.745，P均＜0.05），對(duì)照組無(wú)相關(guān)性（R值分別為-0.135、-0.308、-0.32