普洱茶降糖降脂活性成分的研究.pdf

1、普洱茶是中國黑茶類的特種名茶，飲用歷史悠久。經(jīng)藥理研究證明普洱茶具有降糖降脂的顯著療效。隨著人們對生活質(zhì)量的提高以及追求健康的迫切需要，普洱茶己越來越受到眾多消費(fèi)者的喜愛。但由于普洱茶中的功效成分不明，嚴(yán)重地阻礙了普洱茶健康產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此，本研究采用現(xiàn)代化分離純化技術(shù)與高通量藥理活性篩選技術(shù)相結(jié)合對普洱茶的降糖降脂活性因子進(jìn)行追蹤分離，旨在為全面、系統(tǒng)、合理的開發(fā)利用普洱茶資源提供一定的理論依據(jù)。取得的主要研究結(jié)果如下： 1、

2、普洱茶提取物藥理活性的高通量篩選研究高通量篩選是目前藥物篩選的主流技術(shù)，該技術(shù)具有微量、快速、高效的特點(diǎn)，因而被國外藥物研究機(jī)構(gòu)廣泛采用。本研究首次對普洱茶活性因子進(jìn)行PPAR模型的高通量篩選研究。結(jié)果表明，普洱茶各粗提物對PPARα受體的激活作用很弱，醇提比水提更容易浸出激活PPAR受體的活性成分；在醇提物中，石油醚萃取部分對PPARδ受體激活作用最強(qiáng)，激活倍數(shù)為2.023，氯仿萃取部分與乙酸乙酯萃取部分對PPARγ受體有激活作用，激

3、活倍數(shù)分別為1.554和1.531。這一篩選結(jié)果提示：在普洱茶的粗提物中，石油醚萃取部分，氯仿萃取部分，乙酸乙酯萃取部分可能是其降糖降脂的活性部位。 2、普洱茶提取物中α-淀粉酶抑制劑的篩選研究對α-淀粉酶抑制劑的篩選是降糖降脂藥物篩選的另一有效方法。本研究首次探討普洱茶對α-淀粉酶的抑制作用，以期從中開發(fā)出高活性的α-淀粉酶抑制劑。研究結(jié)果表明，普洱茶的醇提石油醚萃取部分對α-淀粉酶的抑制作用最強(qiáng)，在6mg/ml時(shí)其抑制率達(dá)6

4、9.86％，并且在2-10mg/ml之間有良好的量效關(guān)系；對醇提石油醚萃取部分進(jìn)行硅膠柱層析，并對收集的各組分進(jìn)行α-淀粉酶的抑制作用研究，得到乙酸乙酯洗脫部分的抑制作用最強(qiáng)，是同等情況下石油醚萃取部分抑制效果的1.5倍，是同等情況下醇提物抑制效果的3倍。由此揭示普洱茶醇提石油醚萃取部分乙酸乙酯洗脫物中含有高活性的α-淀粉酶抑制劑。此外，本研究還對普洱茶中α-淀粉酶抑制劑的提取工藝進(jìn)行探討，獲得的最佳提取條件為：浸提時(shí)間3h，固液比1：

5、5，乙醇濃度90％。 3、普洱茶醇提物乙酸乙酯萃取部分的純化及其活性的高通量篩選研究茶多酚是茶葉功能成分研究的重點(diǎn)之一。本研究以醇提乙酸乙酯萃取部分作為活性成分追蹤分離對象，繼續(xù)進(jìn)行活性成分分離純化與活性強(qiáng)度探討。篩選出分離活性成分的最佳大孔樹脂為NKA-9，建立了監(jiān)控活性成分分離的高效液相法，得到了NKA-9樹脂的最佳洗脫條件，以便于各分離組分進(jìn)行下一步的活性篩選；篩選結(jié)果顯示：水洗部分、30％乙醇洗脫部分、50％乙醇洗脫部分

6、均表現(xiàn)出較好的降糖降脂活性，其中降糖活性以水洗部分(Ⅱ-1)活性最高，對PPARγ受體的激活倍數(shù)達(dá)2.171；降脂活性以50％乙醇洗脫部分(Ⅱ-3)活性最高，對PPARδ受體的激活倍數(shù)為1.906，與陽性藥物2-Bro的活性相當(dāng)(1.899)；而兒茶素組分含量最高的30％乙醇洗脫部分(Ⅱ-2)雖然在篩選中也表現(xiàn)出降糖降脂活性，但其降糖活性不及Ⅱ-1組分，降脂活性不及Ⅱ-3組分。綜合各組分的化學(xué)成分分析，說明乙酸乙酯萃取部分中極性較大的水

7、溶性成分降糖活性最強(qiáng)，極性較小的脂溶性成分降脂活性最強(qiáng)。 4、普洱茶降糖降脂功能成分化學(xué)研究以水洗部分(Ⅱ-1)繼續(xù)追蹤分離活性成分，得到2個(gè)單體化合物v-1、v-2。經(jīng)高效液相色譜確定化合物的純度后，結(jié)合其理化性質(zhì)，利用紫外光譜、紅外光譜、核磁共振、質(zhì)譜等波譜分析，鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為尿嘧啶、沒食子酸，其中尿嘧啶為首次從后發(fā)酵的黑茶類中獲得。 5、普洱茶中功能成分單體降糖降脂作用研究首次對普洱茶中分離獲得的單體化合物尿