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文檔簡介
1、目的:研究冬凌草甲素對人肝癌HepG2細胞增殖和自噬誘導(dǎo)的影響,并初步探討其增殖和自噬誘導(dǎo)的作用機制。
方法:以體外培養(yǎng)的肝癌HepG2細胞分別加入濃度為3、6.25、12.5、25、50umol/L的冬凌草甲素,其中0umol/L冬凌草甲素作為空白組，藥物作用24h、48h、72h后，采用MTT法檢測細胞增殖率；用相差顯微鏡觀察不同藥物濃度及不同時間段的肝癌細胞形態(tài)學(xué)的影響；應(yīng)用MDC染色法，熒光顯微鏡下觀察自噬泡的情況；應(yīng)
2、用RT-PCR法檢測肝癌細胞HepG2的beclin1 mRNA表達情況；利用Western blot法檢測beclin1基因蛋白的表達情況。
結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示冬凌草甲素可以抑制肝癌細胞增殖，且存在濃度和時間依賴關(guān)系，以冬凌草甲素50umol/l、72h最明顯，抑制率為81.6％；2. MDC染色法顯示，HepG2細胞經(jīng)冬凌草甲素50umol/l作用72h后自噬泡較空白組明顯增多；3. RT-PCR及Western B
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