銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B的提取、分離與純化研究.pdf

1、銀杏是我國(guó)特有的林源植物,資源擁有量占世界總量的70％以上,主要分布在遼寧、安徽、廣西、四川、湖北、湖南、江蘇、浙江等省區(qū),其葉、果實(shí)、種子均有較高的應(yīng)用價(jià)值。銀杏的化學(xué)成分較為復(fù)雜,銀杏葉中已有報(bào)導(dǎo)的化學(xué)成分多達(dá)180種,其中主要活性成分為萜內(nèi)酯化合物和黃酮類化合物。萜內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯A、B、C、J和M,均為血小板活化因子拮抗劑,其中銀杏內(nèi)酯B的活性最強(qiáng),藥效優(yōu)于總內(nèi)酯,價(jià)格也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于總內(nèi)酯,在醫(yī)藥、食品等行業(yè)受到廣泛重視。<

2、br>　　本文對(duì)銀杏內(nèi)酯B的初步檢測(cè)方法做了研究,探討了紫外分光光度法、薄層色譜法和顯色法的可行性,并比較了三種方法的優(yōu)劣。最終確定紫外分光光法作為銀杏內(nèi)酯B粗提物的檢測(cè)方法,該方法檢測(cè)快速,操作簡(jiǎn)便,效果穩(wěn)定,重現(xiàn)性較好。
　　本文對(duì)不同季節(jié)采摘的銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B的含量進(jìn)行了分離研究,結(jié)果表明以10月下旬采摘的銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B的含量最高。比較了四種溶劑的提取效果,最終選擇乙醇作為溶劑。用乙醇粗提銀杏葉中銀杏內(nèi)酯B,設(shè)計(jì)正交實(shí)

3、驗(yàn),確定最佳工藝。研究表明,當(dāng)料液比(加醇量)1:24g/ml,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間2.5小時(shí),乙醇濃度70%時(shí),效果最佳,粗提得率達(dá)到0.8912%。影響銀杏內(nèi)酯B粗提率的主要因素的顯著性順序?yàn)?料液比>提取次數(shù)>乙醇濃度>提取時(shí)間。
　　選擇大孔樹脂對(duì)銀杏內(nèi)酯粗提物進(jìn)行初步純化。論文考察了不同類型樹脂對(duì)銀杏內(nèi)酯B的純化效果。選擇四類大孔樹脂(分別為酸性、堿性、陰離子、陽(yáng)離子)進(jìn)行樹脂的吸附與解吸效果研究。結(jié)果表明,AB-8弱

4、極性樹脂純化效果最好。最佳動(dòng)態(tài)吸附條件為:吸附流速2BV/h,洗脫流速2BV/h,濃度60%甲醇洗脫,洗脫體積5BV。最佳工藝條件下銀杏內(nèi)酯B的純度為:77.54%。
　　采用層析法精制銀杏內(nèi)酯B,考察了不同流動(dòng)相對(duì)精制結(jié)果的影響。最終以甲醇:水為2:8作為流動(dòng)相時(shí),分離效果較理想。HPLC最終測(cè)定,經(jīng)樹脂純化后的銀杏內(nèi)酯B純度為72.70%,經(jīng)制備型高效液相色譜精制得到的銀杏內(nèi)酯B純度為96.72%,產(chǎn)品最終得率為0.7297%