RSV感染大鼠氣道神經(jīng)營養(yǎng)因子水平與氣道神經(jīng)可塑性研究.pdf

1、目的：建立呼吸道合胞病毒(RSV)感染SD大鼠動(dòng)物模型。研究RSV感染后SD大鼠肺內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子(NGF、BDNF、NT3及NT4)濃度的變化與氣道神經(jīng)可塑性改變間的關(guān)系，為嬰幼兒哮喘的預(yù)防治療提供新的思路。 方法：1-2周齡SD大鼠共60只，隨機(jī)分為2組，A組：正常對(duì)照組；B組RSV感染組。每組30只，采用每周1次呼吸道合胞病毒滴鼻法制作模型。在第8周進(jìn)行氣道阻力測(cè)定，留取左肺行HE染色觀察氣道炎癥改變及免疫組化明確氣道突觸囊

2、泡素和神經(jīng)絲的表達(dá)變化，原位雜交法檢測(cè)肺組織RSV RNA的表達(dá)，取右肺行組織勻漿后，以酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)肺組織勻漿上清液神經(jīng)營養(yǎng)因子(NGF、BDNF、NT3及NT4)濃度的變化。 結(jié)果： (1)一般情況：實(shí)驗(yàn)組大鼠漸出現(xiàn)卡他性鼻炎、呼吸氣促、毛亂、活動(dòng)度降低的臨床表現(xiàn)。 (2)體溫：滴鼻后24小時(shí)內(nèi)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物體溫上升幅度較基礎(chǔ)體溫有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而對(duì)照組滴鼻前后體溫變化沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 (

3、3)體重：干預(yù)8周后，兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重沒有明顯差別。 (4)原位雜交檢測(cè)肺組織RSV RNA的表達(dá)：對(duì)照組大鼠肺組織中未見RSV RNA陽性信號(hào)，而實(shí)驗(yàn)組大鼠肺間質(zhì)細(xì)胞中可見明顯的RSV RNA陽性信號(hào)。 (5)氣道反應(yīng)性：干預(yù)8周后，各組間大鼠的氣道阻力基礎(chǔ)值差異無顯著性，在RSV感染組隨著鹽酸組胺濃度的升高，氣道阻力明顯增高。 (6)HE染色：光鏡下實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織符合典型間質(zhì)性肺炎的病理改變。 (7

4、)免疫組化：8周RSV組大鼠氣道壁突觸囊泡素及神經(jīng)絲陽性分布部位及形態(tài)與對(duì)照組相似，但分布密度較對(duì)照組明顯上調(diào)，陽性產(chǎn)物為棕紅色顆粒，顆粒與對(duì)照組相比較粗大。 (8)神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)水平：RSV感染組NGF及BDNF表達(dá)水平較對(duì)照組明顯增高；而NT3及NT4表達(dá)水平則較對(duì)照組沒有明顯差別。 (9)相關(guān)性分析：NGF及BDNF濃度表達(dá)均與氣道突觸囊泡素表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，與神經(jīng)絲表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，與氣道高反應(yīng)性也呈正相關(guān)關(guān)系