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文檔簡介
1、目的:
觀察大鼠腎缺血-再灌注后尿NGAL濃度、腎組織HIF-1α和NGAL的表達(dá)以及冬蟲夏草干預(yù)后對其的影響,進(jìn)一步探討冬蟲夏草的腎保護(hù)作用機(jī)制。
方法:
將45只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham組,n=15)、缺血-再灌注組(I/R組,n=15)和冬蟲夏草組(CS組,n=15),3組組內(nèi)再按24h、48h、72h3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分成3小組,每組5只。用摘除右腎后夾閉左腎蒂th恢復(fù)再灌注的
2、方法建立腎I/R模型,sham組摘除右腎后未夾閉左腎蒂,術(shù)后每日予以生理鹽水(2ml/d)灌胃,I/R組和冬蟲夏草組分別在術(shù)后予以生理鹽水(2ml/d)和冬蟲夏草提取液(5.0g/kg.d)灌胃,在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠。檢測各組大鼠腎功能(BUN、Scr)、比色法檢測各組大鼠的尿NAG酶、ELISA法檢測各組大鼠尿NGAL濃度、HE染色觀察大鼠腎小管間質(zhì)病理變化,并用腎小管間質(zhì)半定量計(jì)分法分析各組大鼠病理損傷情況、RT-PCR法觀察各組大
3、鼠腎組織中HIF-1α mRNA的表達(dá)水平、免疫熒光共聚焦法觀察各組大鼠腎組織HIF-1α和NGAL蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:
1.與假手術(shù)組相比,缺血-再灌注組大鼠的血清BUN及Scr水平增高,尿NAG酶及NGAL增多,均于24h達(dá)高峰,之后逐漸下降,72h仍較高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。假手術(shù)組大鼠腎小球及小管間質(zhì)均正常,無明顯病理改變;腎缺血-再灌注組出現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞普遍腫脹,可見小管擴(kuò)張,
4、管腔管型,刷狀緣消失,部分上皮細(xì)胞變性壞死等改變,腎小球無明顯病理改變。
2.與假手術(shù)組相比較,缺血-再灌注組各時(shí)間點(diǎn)大鼠腎組織HIF-1α mRNA及蛋白、NGAL蛋白的表達(dá)均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.與缺血-再灌注組相比較,冬蟲夏草組各時(shí)間點(diǎn)的BUN和Scr水平下降、尿NAG酶和尿NGAL濃度降低、腎組織NGAL蛋白的表達(dá)下調(diào)、HIF-1αmRNA及其蛋白的表達(dá)上調(diào)。腎小管病理半定
5、量計(jì)分顯示冬蟲夏草組較缺血再灌注組小管間質(zhì)損傷明顯改善,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1.腎缺血-再灌注大鼠模型病理改變表現(xiàn)為腎小管及腎間質(zhì)受損,與急性腎損傷病理改變特征相符合。
2.腎缺血-再灌注后尿NGAL水平增高,與尿NAG及腎小管間質(zhì)損傷程度成正相關(guān),提示NGAL可能是急性腎損傷時(shí)腎小管損傷特異性的生物標(biāo)志物。
3.冬蟲夏草可能通過改善腎組織中HIF-1α與
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