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1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文結(jié)直腸癌組織LV與TAM相關(guān)性分析姓名:吳芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:張繼民20100601廣州醫(yī)學(xué)院碩士論文結(jié)直腸癌組織LV與TAM相關(guān)性分析3公司。CD68染色過(guò)程中所需的SP2001試劑盒、二抗試劑盒、DAB試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Vect公司。所有切片均設(shè)陽(yáng)性及陰性對(duì)照,并進(jìn)行常規(guī)HE染色。3、染色結(jié)果的判定及細(xì)胞計(jì)數(shù)方法:D240陽(yáng)性細(xì)胞定位于淋巴管上皮細(xì)胞胞膜,呈棕黃色。微淋巴管的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是每個(gè)陽(yáng)
2、性染色的內(nèi)皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞簇或單個(gè)小脈管均視為1個(gè)微淋巴管。參考Weidner的方法先在100倍視野下選擇5處陽(yáng)性細(xì)胞最密集區(qū),然后在200倍視野下計(jì)數(shù),分別計(jì)算出每份標(biāo)本的平均值。CD68陽(yáng)性細(xì)胞染色位于細(xì)胞膜,呈鐵銹色。參考Leek的方法先在低倍視野下選擇5處陽(yáng)性細(xì)胞最密集區(qū),然后在400倍視野下進(jìn)行計(jì)數(shù),然后分別計(jì)算出每份標(biāo)本的平均值。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析、t檢驗(yàn)及Spearman等
3、級(jí)相關(guān)分析,當(dāng)P<0.05時(shí),認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:結(jié)果:1、免疫組織化學(xué)染色形態(tài)學(xué)表現(xiàn):D240抗體標(biāo)記的結(jié)直腸淋巴管陽(yáng)性細(xì)胞呈棕黃色,主要分布于間質(zhì)中,呈圓形或類圓形及條索狀。結(jié)直腸病變組織的淋巴管數(shù)量比正常結(jié)直腸組織的淋巴管多。CD68標(biāo)記的結(jié)直腸癌腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的陽(yáng)性細(xì)胞呈鐵銹色,主要分布于癌間質(zhì)及癌巢間。D240標(biāo)記的結(jié)直腸癌淋巴管主要分布在腫瘤周邊區(qū),數(shù)量多、管腔較大,呈擴(kuò)張狀,而在癌巢間或癌組織內(nèi)存在稀少甚至沒(méi)有,癌組
4、織內(nèi)的淋巴管呈條索或閉鎖狀態(tài)。連續(xù)切片染色發(fā)現(xiàn)淋巴管與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞分布幾乎一致,均分布在癌間質(zhì),癌細(xì)胞未被陽(yáng)性染色。2、免疫組織化學(xué)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)分析:結(jié)直腸癌、結(jié)直腸良性病變組的LV計(jì)數(shù)明顯高于正常結(jié)直腸組的LV,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)直腸癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的LV計(jì)數(shù)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)直腸癌TAM計(jì)數(shù)高于結(jié)直腸良性病變組TAM計(jì)數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、LV與TAM計(jì)數(shù)的相
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