Ⅰ：水飛薊賓純化及水飛薊素固體分散體藥效學(xué)研究Ⅱ：內(nèi)生真菌JJ18接種江灘土壤滅螺活性初步研究.pdf

1、本論文包括兩部分內(nèi)容：
　　 Ⅰ水飛薊賓純化及水飛薊素固體分散體藥效學(xué)研究
　　 水飛薊素(Silymarin)是菊科植物水飛薊(slybum marianum L.Gaertn)，果實(shí)的藥用有效成分的總提取物，其主要成分為水飛薊賓(silybin)、異水飛薊賓(isosilybin)、水飛薊寧(silydianin)、水飛薊亭(silychristin)。水飛薊素作為傳統(tǒng)的保肝藥物，因其確切的療效和極低的毒性，在肝病治

2、療領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用，已積累了30多年的臨床使用經(jīng)驗(yàn)。為了提高水飛薊素的生物利用度，本論文將其制備成固體分散體及進(jìn)行重結(jié)晶純化研究。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)論如下：
　　 (1)將水飛薊籽殼仁分離，用熱回流法對(duì)水飛薊殼中的水飛薊素進(jìn)行熱回流提取，單因素試驗(yàn)優(yōu)化最佳提取條件為：乙酸乙酯與水飛薊殼的料液比=1:6，提取時(shí)間為8 h，提取溫度為78℃。此條件下，熱回流提取一次，水飛薊素得率為4.69％，熱回流提取四次，水飛薊素得率為6.18％

3、。
　　 (2)通過(guò)溶劑法成功的制備了不同比例的水飛薊素-PVP固體分散體，經(jīng)表觀溶解度及溶出度試驗(yàn)考察，選取1：7為最佳比例。此時(shí)固體分散體中水飛薊素在水中的表觀溶解度是水飛薊素的62倍，而在人工胃液中溶出20 min后，其溶出率超過(guò)80％。
　　 (3)利用CCl4致小鼠急性肝損傷模型，檢測(cè)肝系數(shù)及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量，并與片劑益

4、肝靈相比較，用Hism函數(shù)對(duì)各組進(jìn)行綜合考察。結(jié)果顯示，當(dāng)水飛薊素與PVP的比例為1：7，固體分散體對(duì)CCl4致急性肝損傷小鼠的各個(gè)指標(biāo)有明顯的改善作用，且固體分散體高劑量組藥效與空白組最接近，說(shuō)明其效果優(yōu)于片劑益肝靈。
　　 (4)將水飛薊素作為原料，于80℃溶解于乙醇中，4℃冰箱中放置過(guò)夜，進(jìn)行水飛薊賓的重結(jié)晶試驗(yàn)。綜合水飛薊賓純度及收率因素考慮，選擇70％乙醇為重結(jié)晶溶劑。此時(shí)，水飛薊賓的含量可達(dá)97％以上。
　　

5、 Ⅱ內(nèi)生真菌JJ18接種江灘土壤滅螺活性初步研究
　　 血吸蟲病是一種古老的地方性寄生蟲病，嚴(yán)重危害人類健康。釘螺是血吸蟲唯一中間宿主，消滅釘螺具有重要意義。金錢松內(nèi)生真菌JJ18為本課題組從金錢松Pseudolarix kaempferi Gord莖中分離到的一株具有良好的殺滅釘螺活性的菌株。為了進(jìn)一步研究JJ18現(xiàn)場(chǎng)殺滅釘螺的可行性，本研究在實(shí)驗(yàn)室中將JJ18接種到釘螺孳生的江灘土壤中進(jìn)行培養(yǎng)，并對(duì)該土壤浸出液進(jìn)行發(fā)酵，通過(guò)

6、檢測(cè)該發(fā)酵液的殺釘螺活性來(lái)判斷JJ18接種土壤后的生存情況，旨在探索一條新的滅螺路線。本論文主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)論如下：
　　 (1)將內(nèi)生真菌JJ18進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)冷凍干燥、正丁醇提取，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胞內(nèi)產(chǎn)物的正丁醇提取物無(wú)抑菌效果，而胞外產(chǎn)物的正丁醇提取物對(duì)大腸桿菌及金黃色葡萄球菌的MIC分別為0.9 mg/mL和1.35 mg/mL。
　　 (2)將內(nèi)生真菌JJ18接入釘螺孳生的江灘土壤中，實(shí)驗(yàn)室條件下放置一段時(shí)間