Ⅰ：水飛薊賓純化及水飛薊素固體分散體藥效學研究Ⅱ：內生真菌JJ18接種江灘土壤滅螺活性初步研究.pdf

1、本論文包括兩部分內容：
　　 Ⅰ水飛薊賓純化及水飛薊素固體分散體藥效學研究
　　 水飛薊素(Silymarin)是菊科植物水飛薊(slybum marianum L.Gaertn)，果實的藥用有效成分的總提取物，其主要成分為水飛薊賓(silybin)、異水飛薊賓(isosilybin)、水飛薊寧(silydianin)、水飛薊亭(silychristin)。水飛薊素作為傳統(tǒng)的保肝藥物，因其確切的療效和極低的毒性，在肝病治

2、療領域得到廣泛的應用，已積累了30多年的臨床使用經(jīng)驗。為了提高水飛薊素的生物利用度，本論文將其制備成固體分散體及進行重結晶純化研究。主要研究內容及結論如下：
　　 (1)將水飛薊籽殼仁分離，用熱回流法對水飛薊殼中的水飛薊素進行熱回流提取，單因素試驗優(yōu)化最佳提取條件為：乙酸乙酯與水飛薊殼的料液比=1:6，提取時間為8 h，提取溫度為78℃。此條件下，熱回流提取一次，水飛薊素得率為4.69％，熱回流提取四次，水飛薊素得率為6.18％

3、。
　　 (2)通過溶劑法成功的制備了不同比例的水飛薊素-PVP固體分散體，經(jīng)表觀溶解度及溶出度試驗考察，選取1：7為最佳比例。此時固體分散體中水飛薊素在水中的表觀溶解度是水飛薊素的62倍，而在人工胃液中溶出20 min后，其溶出率超過80％。
　　 (3)利用CCl4致小鼠急性肝損傷模型，檢測肝系數(shù)及丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量，并與片劑益

4、肝靈相比較，用Hism函數(shù)對各組進行綜合考察。結果顯示，當水飛薊素與PVP的比例為1：7，固體分散體對CCl4致急性肝損傷小鼠的各個指標有明顯的改善作用，且固體分散體高劑量組藥效與空白組最接近，說明其效果優(yōu)于片劑益肝靈。
　　 (4)將水飛薊素作為原料，于80℃溶解于乙醇中，4℃冰箱中放置過夜，進行水飛薊賓的重結晶試驗。綜合水飛薊賓純度及收率因素考慮，選擇70％乙醇為重結晶溶劑。此時，水飛薊賓的含量可達97％以上。
　　

5、 Ⅱ內生真菌JJ18接種江灘土壤滅螺活性初步研究
　　 血吸蟲病是一種古老的地方性寄生蟲病，嚴重危害人類健康。釘螺是血吸蟲唯一中間宿主，消滅釘螺具有重要意義。金錢松內生真菌JJ18為本課題組從金錢松Pseudolarix kaempferi Gord莖中分離到的一株具有良好的殺滅釘螺活性的菌株。為了進一步研究JJ18現(xiàn)場殺滅釘螺的可行性，本研究在實驗室中將JJ18接種到釘螺孳生的江灘土壤中進行培養(yǎng)，并對該土壤浸出液進行發(fā)酵，通過

6、檢測該發(fā)酵液的殺釘螺活性來判斷JJ18接種土壤后的生存情況，旨在探索一條新的滅螺路線。本論文主要研究內容及結論如下：
　　 (1)將內生真菌JJ18進行液體發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)冷凍干燥、正丁醇提取，結果發(fā)現(xiàn)胞內產(chǎn)物的正丁醇提取物無抑菌效果，而胞外產(chǎn)物的正丁醇提取物對大腸桿菌及金黃色葡萄球菌的MIC分別為0.9 mg/mL和1.35 mg/mL。
　　 (2)將內生真菌JJ18接入釘螺孳生的江灘土壤中，實驗室條件下放置一段時間