水飛薊賓納米脂質(zhì)載體給藥系統(tǒng)的實驗研究.pdf

1、水飛薊賓(Silybin,Sily)是從菊科植物水飛薊中提出的主要有效成分,是由1分子紫杉葉素(taxifolin,類黃酮組分)和1分子松柏醇(coniferylalcohol,木酚素組分)構(gòu)成。藥理實驗表明,水飛薊賓具有清除活性氧、對抗脂質(zhì)過氧化、抑制5’-脂氧合酶、保護肝細胞膜、促進肝細胞修復(fù)、再生、抗肝纖維化等作用,臨床上主要用作急、慢性肝炎,酒精性及中毒性肝損害,脂肪肝及早期肝硬化等肝病的治療。由于水飛薊賓難溶于水及一般有機溶劑

2、,口服吸收差,因此生物利用度較低。早年也有科研工作者研制了水飛薊賓葡甲氨鹽注射劑,但是由于其水溶液不穩(wěn)定；pH值在11左右,注射時局部刺激性較大而很少被應(yīng)用。因此需要尋求新的制劑以克服水飛薊賓水溶性差帶來的療效和臨床應(yīng)用的問題。
　　 本課題采用現(xiàn)代靶向制劑技術(shù),以水飛薊賓(Silybin,Sily)為模型藥物,以具有良好的生物相容性和生物可降解性單硬脂酸甘油酯和中鏈脂肪酸甘油酯為載體材料,采用乳化蒸發(fā)一低溫固化法制備水飛薊賓納

3、米脂質(zhì)載體(Silybin-loadednanostructuredlipidcarriers,Sily-NLC)。實驗以包封率為主要考察指標,通過均勻設(shè)計法對處方工藝進行優(yōu)化,確定最佳處方工藝,并系統(tǒng)的研究了Sily-NLC凍干粉針劑的制備、處方及工藝,考察了制劑的體外釋放特性以及體內(nèi)分布和藥動學(xué)特征。以期通過肝靶向分布達到提高Sily治療肝臟疾病的效果,降低其毒副作用的目的。
　　 通過均勻設(shè)計優(yōu)化的最佳處方工藝為藥脂比為1

4、:20,液態(tài)脂質(zhì)/固態(tài)脂質(zhì)比為1:5,表面活性劑用量為300mg,1.5％穩(wěn)定劑(PluronicF68),攪拌速度1000rmp,乳化溫度為75℃。優(yōu)化工藝操作簡單,所制備的Sily-NLC包封率穩(wěn)定,平均包封率(91.52±1.76)％,載藥量為(4.55±0.08)％。透射電鏡下觀察所得納米粒為類球形,納米粒彼此不粘連,粒徑分布的范圍較窄,平均粒徑為235.9nm,Zeta電位為-20.57mV,pH值為7.19左右。
　　

5、 為提高所制備Sily-NLC的儲存穩(wěn)定性,本文進一步對所制得的Sily-NLC進行了凍干處理,以外觀、色澤、再分散性為評價指標,將Sily-NLC混懸液制成凍干粉針劑,確定其凍干工藝為:在優(yōu)化工藝下制備的水飛薊賓納米脂質(zhì)載體中加入6％甘露醇作為支架劑,振搖使溶解,分裝于10ml西林瓶中,置-80℃的超低溫冰箱中冷凍24h,取出,然后迅速移入冷凍干燥機中,-40℃、0.10mbar條件下凍干48h,即可得Sily-NLC的凍干品。質(zhì)量

6、評價結(jié)果表明凍干過程對藥物的粒徑、載藥量、包封率、Zeta電位及pH值影響較小。對凍干品的DSC和X-射線衍射分析結(jié)果表明,制成納米粒后藥物被載體包裹或吸附,不再是單純的混合,藥物不是以晶體結(jié)構(gòu)存在,即Sily-NLC中形成了新的物相。用離心超濾法對Sily-NLC凍干粉針劑的體外釋藥特性進行了研究,結(jié)果表明Sily-NLC的體外釋藥具有緩釋制劑特征,可用雙指數(shù)方程擬合,方程為1-Q％=0.7925e-0.1059t+0.5020e-0

7、.0359,rα=0.9991,rβ=0.9965。以Sily-NLC的外觀、再分散性、含量、pH和包封率等為指標,評價了Sily-NLC凍干針劑的初步穩(wěn)定性,結(jié)果顯示Sily-NLC凍干粉在室溫(25℃左右)、冷藏條件(4℃左右)條件下放置三個月,其物理、化學(xué)穩(wěn)定性良好。
　　 本文采用HPLC法,分別測定了小鼠尾靜脈注射Sily-Sol和Sily-NLC后在體內(nèi)的組織分布情況,結(jié)果表明水飛薊賓納米脂質(zhì)載體能夠使Sily靶向濃

8、集于吞噬細胞豐富的肝、肺中,并明顯延長Sily在這些組織中的作用時間,從而有利于提高Sily的治療效果,具有重要臨床意義。
　　 在家兔體內(nèi)的藥物動力學(xué)過程,結(jié)果表明Sily-Sol與Sily-NLC的血藥濃度-時間曲線有顯著不同。Sily-Sol組的主要藥動學(xué)參數(shù)為t1/2z=1.233h,MRT=1.620h,清除率CLz=1.342L·h-1·Kg-1,AUC為2.979h-μg·ml-1。Sily-NLC組的主要藥動學(xué)參

9、數(shù)為t1/2z=2.747h,MRT=7.895h,清除率CLz=0.638L·h-1·Kg-1,AUC為6.267h·μg·ml-1。分析結(jié)果可知,Sily-NLC能夠顯著延長Sily在小鼠體內(nèi)的半衰期和體內(nèi)滯留時間,AUC顯著增高,清除率明顯降低,說明將Sily制成Sily-NLC后,有助于提高藥物的生物利用度,并發(fā)揮長效作用。以水飛薊賓為模型藥物制備納米脂質(zhì)載體的研究目前國內(nèi)外尚未見報道,本文的研究成果為難溶性藥物注射劑的開發(fā)提供