卡托普利、心復(fù)康口服液對(duì)心衰大鼠心肌細(xì)胞凋亡和線粒體膜電位的影響.pdf

1、目的：本課題通過(guò)部分縮窄大鼠的腹主動(dòng)脈復(fù)制出大鼠充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)模型，來(lái)研究壓力負(fù)荷性心衰大鼠心功能、線粒體膜電位、心肌細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因Bcl-2和Bax表達(dá)的變化，研究卡托普利、心復(fù)康口服液在心力衰竭發(fā)展過(guò)程中的干預(yù)作用及其可能機(jī)制。 方法：采用腹主動(dòng)脈部分縮窄術(shù)制作充血性心力衰竭大鼠模型，將80只SD大鼠隨機(jī)平均分為假手術(shù)組(Sham operation，SH)、腹

2、主動(dòng)脈縮窄模型組(Coarctation of abdominal aorta，CAA)、卡托普利治療組(Captopril intervention，CAP)、心復(fù)康口服液治療組(XinfuKang Koufuye，XFK)四組。造模術(shù)后1周開(kāi)始灌胃，各組1次/日。CAP組：卡托普利劑量10mg.kg-1.d-1，生理鹽水4ml溶解后灌胃。XFK組：心復(fù)康口服液劑量10ml.kg-1.d-1，加生理鹽水至4ml后灌胃。SH組和CAA紐

3、以同樣方法給與生理鹽水4ml/只。分別于灌胃后第6周、第10周測(cè)量心衰大鼠心功能各指標(biāo)：休幣(BW)、心率(HR)、動(dòng)脈收縮壓(SAP)、動(dòng)脈舒張壓(DAP)、左室重量指數(shù)(LVMI)、左室舒張末壓(LVEDP)、收縮期左心室內(nèi)壓上升的最大變化速率(+dp/dtmax)、舒張期左心室內(nèi)壓卜降的最大變化速率(-dp/dtmax)的變化。應(yīng)用流式細(xì)胞儀，以羅丹明-123為熒光探針測(cè)定心衰大鼠線粒體膜電位(Mitochondrial tran

4、smembrane potential，MMP)變化，采用異硫氰酸(FITC)標(biāo)記的磷脂結(jié)合蛋白V(AnnexinV)與碘化丙啶(PI)雙染法檢測(cè)心衰大鼠心肌細(xì)胞早期凋亡率，用 Bax、Bcl-2小鼠單克隆抗體測(cè)定相關(guān)凋亡基因Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： (1)各組心功能的變化：6周與10周結(jié)果均顯示，CAA組與SH組相比，SAP、DAP、HR、LVEDP、LVMI顯著升高(P<0.01)，+dp/dtmax、

5、-dp/dtmax顯著降低(P<0.01)，CAP組、XFK組與CAA組相比，HR、SAP、DAP、LVMI、LVEDP顯著降低(P<0.01)，+dp/dtmax、-dp/dtmax顯著增高(P<0.01)，XFK組與CAP組相比，各指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05。10周時(shí)與6周時(shí)心功能相比，SH組無(wú)明顯變化(P>0.05 。CAA組大鼠LVMI、LVEDP較6周時(shí)升高(P<0.05)，+dp/dtmax、-dp/dtmax較6周時(shí)顯

6、著下降(P<0.01)。CAP組HR、LVMI、SAP、LVEDP下降(P<0.05)，-dp/dtmax升高(P<0.05)，+dp/dtmax顯著升高(P<0.01)。XFK組HR、LVMI、LVEDP下降(P<0.05)，+dp/dtmax顯著升高(P<0.01)，-dp/dtmax無(wú)明顯變化(P>0.05)。 (2)各組心肌細(xì)胞凋亡和MMP的變化：6周與10刷結(jié)果均顯示，CAA組較SH組細(xì)胞凋亡率顯著升高(P<0.01)

7、， MMP顯著下降(P<0.01), CAP組、XFK組較CAA組細(xì)胞凋亡率顯著降低(P<0.01)，MMP顯著升高(P<0.01)。10周時(shí)與6周時(shí)心肌細(xì)胞凋亡和MMP相比，CAP組細(xì)胞凋亡率顯著降低(P<0.01)，線粒體膜電位明顯升高(P<0.01)，SH組、CAA組、XFK組無(wú)明顯變化(P>0.05)。 (3)各組Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)及Bcl-2/Bax比例的變化：6周與10周結(jié)果均顯示，CAA組較SH組Bcl-2

8、蛋白表達(dá)顯著下降(P<0.01)，Bax蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01)，Bcl-2/Bax比例顯著下降(P<0.01)。CAP組、XFK組較CAA組Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01)，Bax蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.01)，Bcl-2/Bax比例顯著升高(P<0.01)，XFK組較CAP組Bcl-2/Bax比例無(wú)明顯差異(P>0.05)。10周時(shí)與6周相比，CAA組Bcl-2/Bax比例顯著降低(P<0.01)，CAP組和XF

9、K組Bcl-2/Bax比例顯著升高(P<0.01)，SH組無(wú)明顯變化(P>0.05)。 結(jié)論：(1)縮窄腹主動(dòng)脈可明確造成大鼠充血性心力衰竭模型，隨時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠心衰加重，心功能明顯減低。(2)卡托普利能增加Bcl-2蛋白的表達(dá)，降低Bax蛋白的表達(dá)，上調(diào)Bcl-2/Bax比率，穩(wěn)定線粒體膜電位，抑制心肌細(xì)胞凋亡、逆轉(zhuǎn)心室重構(gòu)，改善心功能。(3)心復(fù)康口服液能增加Bcl-2蛋白的農(nóng)達(dá)，降低Bax蛋白的表達(dá)，上調(diào)Bcl-2/Ba