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文檔簡介
1、研究目的:細胞凋亡普遍存在于生物體的心臟發(fā)育過程、機體運動過程、疾病發(fā)生發(fā)展的過程等各項生理病理過程中,但是目前還尚未完全掌握細胞凋亡的機制。通過本次實驗,試圖通過力竭運動的模型,探求SD大鼠心肌細胞凋亡的特征和凋亡發(fā)生發(fā)展變化的規(guī)律,爭取得到與運動負荷與細胞凋亡存在關聯(lián)的證據(jù),此外也可以進一步探討運動引起心肌細胞凋亡的機制,為以后不斷開展運動訓練的監(jiān)控研究,奠定一定的理論依據(jù)。
研究方法:10周齡健康雄性Sprague-
2、Dawley大鼠110只隨機分為安靜對照組(n=10)、力竭運動組(n=50)和力竭運動并灌服丹參注射液組(n=50),其中力竭組和力竭運動并灌服丹參注射液組隨機分成5小組(每組10只):即刻、運動后6h、24h、48h和72h,使之運動3周,每一次運動強度均從5m/min開始,10min內(nèi)逐漸遞增速度至30m/min,坡度為0°,維持這個運動強度,直到大鼠力竭。三組大鼠分別于安靜狀態(tài)和運動后即刻、運動后6h、24h、48h和72h處死
3、,將心臟部分組織制做成組織勻漿,取大鼠的心肌組織制備石蠟切片,然后進行TUNEL標記,在熒光顯微鏡40×10倍下觀察凋亡心肌細胞結(jié)構(gòu)的變化。
實驗結(jié)果:(1)在安靜對照組中,偶見有散在的心肌細胞發(fā)生凋亡,在反復力竭運動組中,可以檢測到明顯的凋亡細胞核,其心肌細胞凋亡指數(shù)比安靜組顯著升高,并且凋亡指數(shù)差異具有顯著意義(p<0.05)。
(2)顯微鏡下能夠觀察到心肌凋亡細胞的細胞形態(tài)發(fā)生了不規(guī)則改變,細胞核內(nèi)染色
4、質(zhì)凝聚到核膜下周邊,線粒體內(nèi)外膜的完整性被破壞,變?yōu)榭张轄?細胞膜和細胞核膜結(jié)構(gòu)被破壞等。在相同時間點上,丹參灌服組和非灌服組在反復力竭運動后心肌細胞凋亡間具有顯著性差異,但兩者動態(tài)變化有一定的相似性。
(3)在力竭運動組中,大鼠心肌組織SOD活性和安靜對照組相比下降很多,其差異具有顯著意義(p<0.05),丹參灌服組SOD活性下降較力竭組緩和。
(4)在力竭運動后,反復力竭運動組大鼠心肌組織中線粒體鈣含量比
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