糖尿病合并高度近視豚鼠視網(wǎng)膜組織VEGF，PEDF，F(xiàn)N的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 探討高度近視對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabeticretinopamy，DR）的阻滯機(jī)制，研究高度近視對(duì)糖尿病豚鼠視網(wǎng)膜組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）、色素上皮衍生因子（pigmentepithelium-derivedfactor，PEDF）、纖維連接蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 分別制作

2、高度近視、糖尿病、糖尿病合并高度近視的三組豚鼠模型。選取出生3天的排除先天性疾病及檢影驗(yàn)光屈光不正者封閉群健康三色豚鼠60只，標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料飼養(yǎng)。并隨機(jī)分為4組：對(duì)照組（a組）15只，擬建高度近視動(dòng)物模型組（b組）15只，擬建糖尿病動(dòng)物模型（c組）15只，擬建糖尿病合并高度近視動(dòng)物模型組（d組）15只。b組及d組所有豚鼠建立形覺剝奪性高度近視模型，以半透明塑料眼罩（10ml塑料試管底制成）行右眼遮蓋作為實(shí)驗(yàn)眼。遮蓋6周后將c組及d組的豚鼠

3、按60mg/kg體重給予小劑量多次重復(fù)腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ），制作糖尿病豚鼠模型。注射3天后測空腹血糖16.5mmol/L以上，尿量及飲水明顯增多者為糖尿病豚鼠。成模后每周測血糖一次。觀察12周，將中間死亡鼠和血糖恢復(fù)鼠棄去，c組剩余的豚鼠中12只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。對(duì)d組的已成糖尿病模型的豚鼠去眼罩，右眼結(jié)膜囊內(nèi)滴1％復(fù)方托吡咔胺滴眼液3次，間隔10min，帶狀光檢影，屈光度>-6.00D者12只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)

4、象。b組的豚鼠右眼結(jié)膜囊內(nèi)滴1％復(fù)方托吡咔胺滴眼液3次，間隔10min，帶狀光檢影，屈光度>-6.00D者，隨機(jī)選取12只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。從對(duì)照組里隨機(jī)選12只及以上選取的36只，共48只豚鼠的右眼作為采集標(biāo)本的對(duì)象。摘除右眼球后固定于10％的福爾馬林液中，石蠟包埋，制成組織切片，行HE染色和免疫組化染色檢測視網(wǎng)膜的VEGF、PEDF及FN的表達(dá)情況。用計(jì)算機(jī)圖像采集系統(tǒng)采集免疫組化載片圖像。BiosensDigitalImagingAn

5、alysisSystems分析系統(tǒng)對(duì)圖像中陽性反應(yīng)部位進(jìn)行陽性平均光密度分析。應(yīng)用SPSS11.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，行方差齊性檢驗(yàn)，再行多組獨(dú)立定量資料的方差分析。取α=0.05作為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 VEGF在各組間的表達(dá)水平均有顯著差異。VEGF陽性平均光密度（opticaldensity，OD）在對(duì)照組為128.61±5.57，在高度近視組為118.24±2.59，在糖尿病組為155.60±9

6、.70，在糖尿病合并高度近視組為135.15±5.22。糖尿病組VEGF水平明顯高于糖尿病合并高度近視組。PEDF的表達(dá)水平除在高度近視組與對(duì)照組無差異外，其余各組間均有顯著差異。PEDF陽性平均光密度在對(duì)照組為145.57±8.35，在高度近視組為149.54±6.20，在糖尿病組為127.71±2.45，在糖尿病合并高度近視組137.53±7.38。糖尿病組PEDF水平明顯低于糖尿病合并高度近視組。FN的表達(dá)水平除在高度近視組與對(duì)照

7、組無差異外，其余各組間均有顯著差異。FN陽性平均光密度在對(duì)照組114.96±4.98，在高度近視組為113.54±6.84，在糖尿病組為148.06±16.07，在糖尿病合并高度近視組為124.8±3.86。糖尿病組FN水平明顯高于糖尿病合并高度近視組。
　　 結(jié)論：
　　 1.糖尿病合并高度近視組視網(wǎng)膜組織中的VEGF的表達(dá)低于糖尿病組。
　　 2.糖尿病合并高度近視組視網(wǎng)膜組織中的PEDF的表達(dá)高于糖尿病組。