黃芪注射液對大鼠慢性胰腺炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：慢性胰腺炎(CP)是普外科難處理的疾病之一，不同病因所致慢性胰腺炎均以胰腺實(shí)質(zhì)慢性炎癥，胰腺體廣泛纖維化伴有腹痛和(或)永久性內(nèi)外分泌功能障礙為基本特征。持續(xù)性胰腺腺泡細(xì)胞被結(jié)締組織替代最終導(dǎo)致胰腺纖維化是慢性胰腺炎的主要病理變化。目前尚無理想的治療CP的化學(xué)藥物，中藥因其具有多組分、多靶點(diǎn)、多途徑的作用特點(diǎn)在抗纖維化方面展現(xiàn)出優(yōu)勢，顯示了良好的前景。
　　 目的：觀察黃芪注射液對胰腺纖維化大鼠胰腺組織轉(zhuǎn)化生長因子(TGF

2、β1)，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)，金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMP-1)的影響結(jié)果，探討黃芪注射液抗胰腺纖維化的療效及作用機(jī)理。
　　 方法：
　　 第一部分、采用大鼠胰膽管內(nèi)注射2％三硝基苯磺酸(TNBS)，制備大鼠胰腺纖維化模型。將72只雄性SD大鼠稱重、編號，應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表將其隨機(jī)分為模型組和對照組，每組36只，模型組大鼠，胰膽管內(nèi)注射含2％TNBS的乙醇磷酸鹽緩沖溶液0.4ml，對照組給與同體積等體積乙醇磷酸

3、鹽緩沖溶液。分別于術(shù)后1、2、3、4、5、6周六個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)稱量體重后處死模型組和對照組的各6只大鼠。HE染色病理切片觀察纖維化的程度；免疫組織化學(xué)檢測胰腺組織中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、膠原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ，CO-Ⅰ)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factorbeta-1,TGFβ1)表達(dá)情況。
　　 第二部分、模型制造成功后取

4、50只雄性SD大鼠，體重位于220～250g，隨機(jī)分為5組，每組10只：對照組(A組)、模型組(B組)、黃芪注射液治療組(C、D、E組)，黃芪注射液治療分為3個(gè)劑量組：分別為400mg/kg(低劑量組，C組)、800mg/kg(中劑量組，D組)、1600mg/kg(高劑量組，E組)連續(xù)肌肉注射4周，而對照組則給予同體積的生理鹽水。4周后稱量體重后處死大鼠取標(biāo)本檢測。HE染色病理切片觀察纖維化的程度；免疫組織化學(xué)檢測胰腺組織中TGF-β1

5、、MMP-1、TIMP-1的含量。
　　 結(jié)果(一)：
　　 采用大鼠胰膽管內(nèi)注射2％TNBS能夠制造穩(wěn)定的大鼠慢性胰腺炎模型，成模時(shí)間在4周時(shí)較為典型。
　　 結(jié)果(二)：
　　 與對照組比較，模型組大鼠胰腺組織TGFβ1、TIMP-1的表達(dá)增強(qiáng)，有顯著性差異(P＜0.01)；MMP-1的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；黃芪注射液高、中、低劑量組分別與模型組比較，胰腺組織MMP-1的表達(dá)明顯增加，而T

6、IMP-1的表達(dá)明顯減少，均有顯著差異(P＜0.01)；黃芪注射液高、中劑量組與對照組、低劑量組比較，TGFβ1、TIMP-1、MMP-1的表達(dá)量具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；黃芪注射液高劑量組與中劑量組相比較，三者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)成功地復(fù)制了大鼠慢性胰腺炎的模型。
　　 2.黃芪注射液可以增強(qiáng)胰腺纖維化組織MMP-1的表達(dá)，抑制TIMP-1的表達(dá)，同時(shí)降低胰腺